Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNase සමඟ)(lncRNA වෙතින් පළමු තන්තු cDNA සංශ්ලේෂණය සඳහා සුපිරි Premix)
පිරිවිතර
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase සමඟ) යනු ප්‍රවේණි DNA දූෂණය ඉක්මනින් ඉවත් කිරීම සඳහා lncRNA සඳහා විෙශේෂෙයන් නිර්මාණය කරන ලද ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පද්ධතියකි.5×gDNase මිශ්‍රණයට විනාඩි 2ක් සඳහා 42°C දී RNA හි ඉතිරි ජෙනෝමය ඉක්මනින් ඉවත් කළ හැකි අතර, qPCR ප්‍රතිඵල මත ජෙනෝමයේ මැදිහත්වීම් ඵලදායී ලෙස වළක්වා ගත හැක.
5×L-RT HeroTM Mix හි Foregene විසින් විෙශේෂෙයන් සංවර්ධනය කරන ලද Foregene LncRNA Reverse Transcriptase අඩංගු වන අතර, එය LncRNA සහ අනෙකුත් දිගු RNA සංකීර්ණ සැකිලි සඳහා විෙශේෂෙයන්ම, ශක්තිමත් RNA සම්බන්ධයක් සහ ඉහළ ප්‍රතිවර්තන පටිගත කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයක් සහිත නව ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස් වර්ගයකි.ප්‍රශස්ත පද්ධතිය ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ වේගය වේගවත් කරන අතර ඉහළ GC අන්තර්ගතය සහ සංකීර්ණ ද්විතියික ව්‍යුහය සහිත RNA සැකිලි පහසුවෙන් පිටපත් කළ හැක.පළමු කෙඳි cDNA සංස්ලේෂණය විනාඩි 15 කින් 42 ° C දී අවසන් කළ හැකිය.
කට්ටල සංරචක
| 5× gDNase මිශ්රණය |
| 5× L-RT HeroTM මික්ස් |
| RNase-නිදහස් ddH2O |
| උපදෙස් |
විශේෂාංග සහ වාසි
■gDNA ඉවත් කිරීමට කාර්යක්ෂම හැකියාව, එය විනාඩි 2 ක් ඇතුළත අච්චුව තුළ gDNA ඉවත් කළ හැකිය.
■ එයට lncRNA පිටපත් කිරීම කාර්යක්ෂමව ආපසු හැරවිය හැක.ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ නිෂ්පාදනය qPCR වෙත යටත් කළ විට, Ct අගය සාම්ප්‍රදායික ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පද්ධතියට වඩා අඩුය.
■ කාර්යක්ෂම ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පද්ධතිය, පළමු තන්තු cDNA සංශ්ලේෂණය සම්පූර්ණ කිරීමට ගත වන්නේ මිනිත්තු 15ක් පමණි.
■ සංකීර්ණ සැකිලි: ඉහළ GC අන්තර්ගතය සහ සංකීර්ණ ද්විතියික ව්‍යුහය සහිත සැකිලි ද ඉහළ කාර්යක්ෂමතාවයකින් ආපසු හැරවිය හැක.
■ අධි-සංවේදී ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පද්ධතිය, pg මට්ටමේ සැකිලි ද උසස් තත්ත්වයේ cDNA ලබා ගත හැක.
■ ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ පද්ධතියට ඉහළ තාප ස්ථායීතාවයක් ඇත, ප්‍රශස්ත ප්රතික්රියා උෂ්ණත්වය 42 වේ℃, සහ එය තවමත් 50 හි හොඳ ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ කාර්ය සාධනයක් ඇත℃.
කට්ටල යෙදුම
lncRNA සාපේක්ෂ ප්‍රමාණාත්මක විශ්ලේෂණය.
lncRNA නිරපේක්ෂ ප්‍රමාණාත්මක විශ්ලේෂණය.
එයට RNA වෛරසය වැනි RNA සොයාගැනීම් ඉක්මනින් හා නිවැරදිව විශ්ලේෂණය කළ හැක.
ඉහළ GC අන්තර්ගතයක් හෝ සංකීර්ණ ද්විතියික ව්‍යුහයක් සහිත RNA සැකිලි ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම.
වැඩ ප්රවාහය
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීම
කට්ටලය -20 දී ගබඩා කළ යුතුය°C. නිශ්පාදනය -20 හි නියත උෂ්ණත්ව ශීතකරණයක් තුළ ගබඩා කරන්න°ලැබුණු වහාම C.ගබඩා කොන්දේසි සුදුසු නම්, නිෂ්පාදිතය වසර 1ක වලංගු කාලය තුළ කිසිදු කාර්ය සාධනයක් පිරිහීමට ලක් නොවේ.
ගැටළු විශ්ලේෂණ මාර්ගෝපදේශය
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-නිශ්චිත විස්තාරණය
1. අසාධාරණ ප්‍රයිමර් නිර්මාණය
නිර්දේශය: ප්‍රයිමර් සැලසුම් මූලධර්මවලට අනුව ප්‍රයිමර් සැලසුම් කරන්න.
2. ජෙනෝම අවශේෂ.
යෝජනාව: gDNA ඉවත් කිරීමේ ප්රතික්රියා උෂ්ණත්වයේ පළමු පියවර 42°C බව සහතික කර ගන්න, ප්රතික්රියා කාලය විනාඩි 5 දක්වා දීර්ඝ කළ හැක.
RT-qPCR මගින් විස්තාරණ සංඥාවක් නොමැත
1. RNA ක්ෂය වේ.
නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණය සඳහා ද්‍රව්‍ය හැකිතාක් නැවුම් විය යුතු අතර උසස් තත්ත්වයේ සහ ඉහළ සංශුද්ධතාවයකින් යුත් RNA භාවිතා කළ යුතුය.
2. RNA වල නිෂේධක අඩංගු වේ.
නිර්දේශය: ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ නිෂේධකවල සාමාන්‍යයෙන් SDS, ගුවානඩින් ලවණ, EDTA, ආදිය ඇතුළත් වේ. නිෂේධක ඉවත් කිරීම සඳහා RNA අවක්ෂේපය 70% එතනෝල් සමඟ සේදීම නිර්දේශ කෙරේ.
3. ප්‍රයිමර් සැලසුම් ගැටළු.
නිර්දේශය: ප්‍රයිමර් සැලසුම් මූලධර්මය අනුව, පරීක්ෂා කිරීම සඳහා ප්‍රයිමර් නැවත සැලසුම් කරන්න.
ඉලක්ක කලාපය හිස් පාලනයේ දිස්වේ
1. මෙහෙයුම් මෙවලම් හෝ ප්රතික්රියාකාරක අපවිත්ර වීම.
නිර්දේශය: අත්හදා බැලීම සඳහා සියලුම ප්රතික්රියාකාරක හෝ උපකරණ ස්වයංක්‍රීයකරණය කළ යුතුය.DNA සාම්පල පයිප්පයට උරාබීම හෝ කේන්ද්‍රාපසාරී නලයෙන් පිටතට කාන්දු වීම වැළැක්වීම සඳහා හැසිරවීමේදී ප්‍රවේශම් සහ මෘදු වන්න.
2. PCR ප්රතික්රියා පද්ධතිය සකස් කිරීමේදී දූෂණය සිදු විය.
නිර්දේශය: හැසිරවීමේදී අවශ්‍ය පූර්වාරක්ෂාවන් ගන්න, එනම්: රබර් කිරි අත්වැසුම් පැළඳීම, පෙරහන් ඉඟි භාවිතා කිරීම.දූෂණය නොවන පද්ධතියක රියල් ටයිම් PCR මිශ්රණය භාවිතා කරන්න.
3. ප්‍රාථමිකයන් පිරිහී ඇත.
යෝජනාව: ප්‍රයිමර් දිරාපත් වී ඇත්දැයි හඳුනා ගැනීමට SDS-PAGE විද්යුත් විච්ඡේදනය භාවිතා කරන්න, සහ ප්‍රතිදීප්ත හඳුනාගැනීමේ පරීක්ෂණ සඳහා නව ප්‍රයිමර් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
උපදෙස් අත්පොත:
Lnc-RT HeroTM I(gDNase සමඟ)(lncRNA වෙතින් පළමු පෙළ cDNA සංශ්ලේෂණය සඳහා සුපිරි Premix) උපදෙස් අත්පොත
