මූලික අණුක ජීව විද්‍යා නියමයන් පැහැදිලි කිරීම
1. cDNA සහ cccDNA: cDNA යනු mRNA වලින් ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස් මගින් සංස්ලේෂණය කරන ලද ද්විත්ව නූල් සහිත DNA වේ;cccDNA යනු වර්ණදේහයෙන් තොර ප්ලාස්මිඩ් ද්විත්ව නූල් සහිත සංවෘත වෘත්තාකාර DNA වේ.
2. සම්මත නැමීමේ ඒකකය: ප්‍රෝටීන් ද්විතියික ව්‍යුහ ඒකකය α-helix සහ β-ෂීට් විවිධ සම්බන්ධක පොලිපෙප්ටයිඩ හරහා විශේෂ ජ්‍යාමිතික සැකසුම් සහිත ව්‍යුහාත්මක කුට්ටි සෑදිය හැක.මෙම වර්ගයේ අධිෂ්ඨානශීලී නැමීම් සාමාන්යයෙන් සුපිරි ද්විතියික ව්යුහය ලෙස හැඳින්වේ.සියලුම තෘතීයික ව්‍යුහයන් පාහේ මෙම නැමීම් වර්ග සහ ඒවායේ ඒකාබද්ධ වර්ග මගින් විස්තර කළ හැකි බැවින් ඒවා සම්මත නැමීමේ ඒකක ලෙසද හැඳින්වේ.
3. CAP: චක්‍රීය ඇඩෙනොසීන් මොනොපොස්පේට් (cAMP) ප්‍රතිග්‍රාහක ප්‍රෝටීන් CRP (cAMP ප්‍රතිග්‍රාහක ප්‍රෝටීන්), cAMP සහ CRP සංයෝගයෙන් පසු සෑදෙන සංකීර්ණය සක්‍රීය ප්‍රෝටීන් CAP (cAMP සක්‍රිය ප්‍රෝටීන්) ලෙස හැඳින්වේ.
4. Palindromic අනුක්‍රමය: DNA කොටසක කොටසක ප්‍රතිලෝම අනුපූරක අනුපිළිවෙල, බොහෝ විට සීමා කිරීම් එන්සයිම අඩවියකි.
5. micRNA: mRNA අනුපිළිවෙලට අනුපූරක වන සහ mRNA පරිවර්තන වලක්වා ගත හැකි අනුපූරක මැදිහත් RNA හෝ antisense RNA.
6. රයිබොසයිම්: ආර්එන්ඒ බෙදීමේ ක්‍රියාවලියේදී ස්වයංක්‍රීය උත්ප්‍රේරක භූමිකාවක් ඉටු කරන උත්ප්‍රේරක ක්‍රියාකාරකම් සහිත ආර්එන්ඒ.
7. Motif: ප්‍රෝටීන් අණුවල අවකාශීය ව්‍යුහයේ සමාන ත්‍රිමාන හැඩයක් සහ ස්ථල විද්‍යාවක් සහිත සමහර ප්‍රාදේශීය කලාප ඇත.
8. සංඥා පෙප්ටයිඩ: ප්‍රෝටීන් සංශ්ලේෂණය අතරතුර N-පර්යන්තයේ ඇමයිනෝ අම්ල 15-36 අපද්‍රව්‍ය සහිත පෙප්ටයිඩයක් වන අතර එය ප්‍රෝටීනයේ ට්‍රාන්ස්මෙම්බ්‍රේනයට මග පෙන්වයි.
9. Attenuator: ක්‍රියාකරු කලාපයක් සහ පිටපත් කිරීම අවසන් කරන ව්‍යුහාත්මක ජානයක් අතර නියුක්ලියෝටයිඩ අනුක්‍රමයක්.
10. මැජික් ස්පොට්: බැක්ටීරියාව වර්ධනය වී සම්පූර්ණ ඇමයිනෝ අම්ල හිඟයක් ඇති වූ විට, සියලුම ජානවල ප්‍රකාශනය නැවැත්වීමට බැක්ටීරියා හදිසි ප්‍රතිචාරයක් ඇති කරයි.මෙම හදිසි ප්‍රතිචාරය ජනනය කරන සංඥා වන්නේ guanosine tetraphosphate (ppGpp) සහ guanosine pentaphosphate (pppGpp) ය.PpGpp සහ pppGpp වල කාර්යභාරය ඔපෙරෝන් එකක් හෝ කිහිපයක් පමණක් නොව ඒවායින් විශාල සංඛ්‍යාවකට බලපාන බැවින් ඒවා සුපිරි නියාමකයින් හෝ මැජික් ස්ථාන ලෙස හැඳින්වේ.
11. Upstream ප්‍රවර්ධක මූලද්‍රව්‍යය: -10 කලාපයේ TATA, -35 කලාපයේ TGACA, වැඩි දියුණු කරන්නන්, සහ attenuators වැනි ප්‍රවර්ධකයාගේ ක්‍රියාකාරකම්වල නියාමන භූමිකාවක් ඉටු කරන DNA අනුපිළිවෙලට යොමු වේ.
12. DNA පරීක්ෂණය: නොදන්නා අනුපිළිවෙලක් හඳුනා ගැනීමට සහ ඉලක්කගත ජාන තිර කිරීමට බහුලව භාවිතා වන දන්නා අනුපිළිවෙලක් සහිත DNA වල ලේබල් කරන ලද කොටසකි.
13. SD අනුපිළිවෙල: එය පරිවර්තනය නියාමනය කරන රයිබසෝම සහ mRNA වල බන්ධන අනුපිළිවෙලයි.
14. මොනොක්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ: තනි ප්‍රතිදේහජනක නිර්ණායකයකට එරෙහිව පමණක් ක්‍රියා කරන ප්‍රතිදේහයකි.
15. Cosmid: එය කෘත්‍රිමව සාදන ලද බාහිර DNA දෛශිකයක් වන අතර එය phage දෙකෙහිම COS කලාප රඳවා තබා ගන්නා අතර ප්ලාස්මිඩයට සම්බන්ධ වේ.
16. නිල්-සුදු ලප පිරික්සීම: LacZ ජානය (β-galactosidase කේතනය කිරීම), එන්සයිමයට X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ක්‍රොමොජනික් උපස්ථරය වියෝජනය කර නිල් පැහැයක් ඇති කරයි.බාහිර DNA ඇතුල් කළ විට, LacZ ජානය ප්‍රකාශ කළ නොහැකි අතර, ප්‍රතිසංයෝජක බැක්ටීරියා තිරගත වන පරිදි වික්‍රියාව සුදු වේ.මෙය නිල්-සුදු තිරගත කිරීම ලෙස හැඳින්වේ.
17. Cis-ක්‍රියාකාරී මූලද්‍රව්‍යය: ජාන ප්‍රකාශනය නියාමනය කරන DNA හි නිශ්චිත භෂ්ම අනුපිළිවෙලකි.
18. Klenow එන්සයිම: DNA පොලිමරේස් I හි විශාල කොටස, 5' 3' exonuclease ක්‍රියාකාරිත්වය DNA polymerase I holoenzyme වෙතින් ඉවත් කරනු ලැබේ.
19. නැංගුරම් දැමූ PCR: එක් කෙළවරක දන්නා අනුපිළිවෙලක් සමඟ උනන්දුවක් දක්වන DNA වර්ධක කිරීමට භාවිතා කරයි.නොදන්නා අනුපිළිවෙලෙහි එක් කෙළවරකට බහු-dG වලිගයක් එකතු කරන ලද අතර, පසුව PCR විස්තාරණය සඳහා ප්‍රාථමික ලෙස poly-dC සහ දන්නා අනුපිළිවෙල භාවිතා කරන ලදී.
20. ෆියුෂන් ප්‍රෝටීන්: යුකැරියෝටික් ප්‍රෝටීන් වල ජානය බාහිර ජාන සමඟ සම්බන්ධ වී ඇති අතර මුල් ජාන ප්‍රෝටීන් සහ බාහිර ප්‍රෝටීන් පරිවර්තනයෙන් සමන්විත ප්‍රෝටීනය එකවර ප්‍රකාශ වේ.
වෙනත් අණුක ජීව විද්‍යා පද
1. DNA හි භෞතික සිතියම යනු DNA අණුවේ (සීමා endonuclease-digested) කොටස් සකස් කර ඇති අනුපිළිවෙලයි.
2. RNase හි ඛණ්ඩනය වර්ග දෙකකට බෙදා ඇත (ස්වයංක්‍රීයකරණය) සහ (heterocatalysis).
3. ප්‍රොකරියෝට් වල ආරම්භක සාධක තුනක් ඇත (IF-1), (IF-2) සහ (IF-3).
4. ට්‍රාන්ස්මෙම්බ්‍රේන් ප්‍රෝටීන සඳහා මග පෙන්වීමක් (සංඥා පෙප්ටයිඩ) අවශ්‍ය වන අතර ප්‍රෝටීන් චැපරෝන් වල කාර්යභාරය වන්නේ (පෙප්ටයිඩ දාමය ප්‍රෝටීන වල ස්වදේශික අනුරූපණයට නැමීමට උපකාරී වේ).
5. ප්‍රවර්ධකයන්ගේ මූලද්‍රව්‍ය සාමාන්යයෙන් වර්ග දෙකකට බෙදිය හැකිය: (මූලික ප්‍රවර්ධක මූලද්‍රව්‍ය) සහ (උඩු ප්‍රවර්ධක මූලද්‍රව්‍ය).
6. අණුක ජීව විද්‍යාවේ පර්යේෂණ අන්තර්ගතයට ප්රධාන වශයෙන් කොටස් තුනක් ඇතුළත් වේ: (ව්‍යුහාත්මක අණුක ජීව විද්යාව), (ජාන ප්‍රකාශනය සහ නියාමනය) සහ (ඩීඑන්ඒ ප්‍රතිසංයෝජන තාක්ෂණය).
7. DNA යනු ජානමය ද්‍රව්‍ය බව පෙන්නුම් කරන ප්රධාන පරීක්ෂණ දෙක නම් (මීයන්ගේ pneumococcus ආසාදනය) සහ (Escherichia coli හි T2 phage ආසාදනය) වේ.විභවය).
8. hnRNA සහ mRNA අතර ප්රධාන වෙනස්කම් දෙකක් තිබේ: (mRNA බවට පරිවර්තනය කිරීමේ ක්‍රියාවලියේදී hnRNA බෙදනු ලැබේ), (mRNA හි 5' අන්තය m7pGppp තොප්පියකින් එකතු කර ඇති අතර mRNA අම්ලයේ (polyA) වලිගයේ 3' අන්තයේ අමතර බහුඅඩනිලීකරණයක් ඇත).
9. ප්‍රෝටීන් බහු-උප ඒකක ආකෘතියේ ඇති වාසි නම් (උප ඒකකය යනු DNA භාවිතය සඳහා ආර්ථිකමය ක්‍රමයකි), (ප්‍රෝටීන් ක්‍රියාකාරකම් මත ප්‍රෝටීන් සංස්ලේෂණයේ අහඹු දෝෂ වල බලපෑම අඩු කළ හැකිය), (ක්‍රියාකාරීත්වය ඉතා කාර්යක්ෂමව හා වේගයෙන් විවෘත කර වසා දැමිය හැක).
10. ප්‍රෝටීන් නැමීමේ යාන්ත්‍රණයේ පළමු න්‍යෂ්ටික සිද්ධාන්තයේ ප්රධාන අන්තර්ගතය (න්‍යෂ්ටිකකරණය), (ව්‍යුහාත්මක සුපෝෂණය), (අවසාන නැවත සකස් කිරීම) ඇතුළත් වේ.
11. ග්ලැක්ටෝස් බැක්ටීරියා මත ද්විත්ව බලපෑමක් ඇත;එක් අතකින් (එය සෛල වර්ධනය සඳහා කාබන් ප්රභවයක් ලෙස භාවිතා කළ හැක);අනෙක් අතට (එය සෛල බිත්තියේ අංගයක් ද වේ).එබැවින්, පසුබිම් මට්ටමේ ස්ථිර සංශ්ලේෂණය සඳහා cAMP-CRP-ස්වාධීන ප්‍රවර්ධක S2 අවශ්‍ය වේ;ඒ සමගම, ඉහළ මට්ටමේ සංශ්ලේෂණය නියාමනය කිරීම සඳහා cAMP-CRP මත යැපෙන ප්‍රවර්ධක S1 අවශ්‍ය වේ.පිටපත් කිරීම ආරම්භ වන්නේ ( S2 ) G සමඟින් සහ ( S1 ) G නොමැතිව.
12. ප්‍රතිසංයෝජක DNA තාක්ෂණය (ජාන ක්ලෝනීකරණය) හෝ (අණුක ක්ලෝනකරණය) ලෙසද හැඳින්වේ.අවසාන ඉලක්කය වන්නේ (එක් ජීවියෙකුගේ ජානමය තොරතුරු DNA තවත් ජීවියෙකු වෙත මාරු කිරීමයි).සාමාන්ය DNA ප්‍රතිසංයෝජන පරීක්ෂණයකට සාමාන්යයෙන් පහත පියවර ඇතුළත් වේ: (1) දායක ජීවියාගේ ඉලක්කගත ජානය (හෝ බාහිර ජානය) නිස්සාරණය කර නව ප්‍රතිසංයෝජන DNA අණුවක් සෑදීම සඳහා එය වෙනත් DNA අණුවකට (ක්ලෝන දෛශිකයක්) එන්සයිමය වශයෙන් සම්බන්ධ කරන්න.② ප්‍රතිසංයෝජක DNA අණුව ලබන්නාගේ සෛලයට මාරු කර ලබන්නාගේ සෛලය තුළ ප්‍රතිවර්තනය වේ.මෙම ක්රියාවලිය පරිවර්තනය ලෙස හැඳින්වේ.③ ප්‍රතිසංයෝජන DNA අවශෝෂණය කර ඇති ග්‍රාහක සෛල පරීක්ෂා කර හඳුනා ගන්න.④විදේශ ආධාරක ජානය ප්‍රකාශ වී ඇත්දැයි හඳුනා ගැනීම සඳහා ප්‍රතිසංයෝජන DNA අඩංගු සෛල විශාල වශයෙන් වගා කරන්න.
13. ප්ලාස්මිඩ් ප්‍රතිනිර්මාණ වර්ග දෙකක් තිබේ: ධාරක සෛල ප්‍රෝටීන් සංස්ලේෂණය මගින් දැඩි ලෙස පාලනය වන ඒවා (තද ප්ලාස්මිඩ) ලෙස හැඳින්වේ, සහ ධාරක සෛල ප්‍රෝටීන් සංස්ලේෂණය මගින් දැඩි ලෙස පාලනය නොකරන ඒවා (ලිහිල් ප්ලාස්මිඩ්) ලෙස හැඳින්වේ.
14. PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතියට පහත කොන්දේසි තිබිය යුතුය: a.වෙන් කළ යුතු ඉලක්කගත ජානයේ කෙඳි දෙකේ එක් එක් අන්තයේ අනුපූරක අනුපිළිවෙලක් සහිත DNA ප්‍රාථමික (පදනම 20ක් පමණ).බී.තාප ස්ථායීතාවය සහිත එන්සයිම: TagDNA පොලිමරේස්.c, dNTPd, අච්චුව ලෙස උනන්දුවක් දක්වන DNA අනුපිළිවෙල
15. PCR හි මූලික ප්‍රතික්‍රියා ක්‍රියාවලියට අදියර තුනක් ඇතුළත් වේ: (denaturation), (annealing) සහ (දිගුව).
16. සංක්‍රාන්ති සත්වයන්ගේ මූලික ක්‍රියාවලියට සාමාන්යයෙන් ඇතුළත් වන්නේ: ① සංසේචනය වූ බිත්තරයක හෝ කළල ප්‍රාථමික සෛලයක න්‍යෂ්ටිය තුළට ක්ලෝන කරන ලද විදේශීය ජානය හඳුන්වා දීම;එන්නත් කළ සංසේචනය කළ බිත්තරය හෝ කළල ප්‍රාථමික සෛලය කාන්තා ගර්භාෂයට බද්ධ කිරීම;③සම්පූර්ණ කළල වර්ධනය හා වර්ධනය විදේශීය ජාන සහිත දරුවන් සඳහා;④ නව සමලිංගික රේඛා බෝ කිරීම සඳහා අභිජනන කොටස් ලෙස විදේශීය ප්‍රෝටීන නිපදවිය හැකි මෙම සතුන් භාවිතා කරන්න.
17. හයිබ්‍රිඩෝමා සෛල රේඛා ජනනය කරනු ලබන්නේ (මයිලෝමා) සෛල සමඟ දෙමුහුන් (ප්ලීහාව B) සෛල මගින් වන අතර, (ප්ලීහාව සෛල) හයිපොක්සැන්තයින් භාවිතා කළ හැකි අතර (අස්ථි සෛල) සෛල බෙදීමේ ක්‍රියාකාරකම් සපයන බැවින්, ඒවා HAT මාධ්‍යයෙන් වගා කළ හැක.වර්ධනය වේ.
18. පර්යේෂණ ගැඹුරු වීමත් සමඟ, පළමු පරම්පරාවේ ප්‍රතිදේහ (පොලික්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ), දෙවන පරම්පරාව (මොනොක්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ) සහ තුන්වන පරම්පරාව (ජාන ඉංජිනේරු ප්‍රතිදේහ) ලෙස හැඳින්වේ.
19. වර්තමානයේදී, කෘමි වෛරස් වල ජාන ඉංජිනේරු විද්යාව ප්රධාන වශයෙන් බකුලෝ වයිරසය කෙරෙහි අවධානය යොමු කර ඇති අතර එය (බාහිර විෂ ජානය) හඳුන්වාදීමේදී ප්‍රකාශ වේ;(කෘමීන්ගේ සාමාන්ය ජීවන චක්රය කඩාකප්පල් කරන ජාන);(වෛරස් ජාන වෙනස් කිරීම).
20. ක්ෂීරපායී RNA පොලිමරේස් II ප්‍රවර්ධකයේ පොදු මූලද්‍රව්‍ය වන TATA, GC සහ CAAT වලට අනුරූප වන පරිවර්තන ප්‍රෝටීන් සාධක වන්නේ (TFIID), (SP-1) සහ (CTF/NF1) වේ.
විසි එකයි.RNA පොලිමරේස් Ⅱ හි මූලික පිටපත් කිරීමේ සාධක වන්නේ, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, සහ ඒවායේ බන්ධන අනුපිළිවෙල: (D, A, B, E).TFII-D හි කාර්යය වන්නේ (ටාටා පෙට්ටියට බැඳීම)
විසි දෙකයි.DNA වලට බන්ධනය වන බොහෝ පිටපත් කිරීමේ සාධක ඩයිමර් ආකාරයෙන් ක්‍රියා කරයි.DNA වලට බන්ධනය වන පිටපත් කිරීමේ සාධකවල ක්‍රියාකාරී වසම් සාමාන්යයෙන් පහත (helix-turn-helix), (සින්ක් ඇඟිලි මෝස්තරය), (මූලික-ලියුසීන්) සිපර් මෝස්තරය) වේ.
විසි තුනයි.සීමා කිරීම් endonuclease cleavage modes වර්ග තුනක් ඇත: (5' ඇලෙන සුළු අන්ත ජනනය කිරීම සඳහා සමමිතික අක්ෂයේ 5' පැත්තේ කපා), (3' ඇලෙන සුළු අන්ත ජනනය කිරීම සඳහා සමමිතික අක්ෂයේ 3' පැත්තේ කපා (පැතලි කොටස් ජනනය කිරීම සඳහා සමමිතික අක්ෂයේ කපා) ).
විසි හතරයි.ප්ලාස්මිඩ් DNA විවිධ වින්‍යාස තුනක් ඇත: (SC වින්‍යාසය), (oc වින්‍යාසය), (L වින්‍යාසය).විද්යුත් විච්ඡේදනයේ පළමුවැන්න (SC වින්‍යාසය) වේ.
25. බාහිර ජාන ප්‍රකාශන පද්ධති, ප්රධාන වශයෙන් (Escherichia coli), (යීස්ට්), (කෘමියා) සහ (ක්ෂීරපායි සෛල වගුව).
26. සංක්‍රාන්ති සතුන් සඳහා බහුලව භාවිතා වන ක්‍රම නම්: (ප්‍රතිවෛරස් ආසාදන ක්‍රමය), (ඩීඑන්ඒ ක්ෂුද්‍ර එන්නත් ක්‍රමය), (කළල ප්‍රාථමික සෛල ක්‍රමය).
යෙදුම අණුක ජීව විද්යාව
1. RNA 5 ට වඩා වැඩි කාර්යයන් නම් කරන්න?
RNA tRNA හුවමාරු ඇමයිනෝ අම්ලය Ribosome RNA rRNA Ribosome සෑදී ඇත පණිවිඩකරු RNA mRNA ප්‍රෝටීන් සංස්ලේෂණ සැකිල්ල විෂමජාතීය න්‍යෂ්ටික RNA hnRNA පරිණත mRNA හි පූර්වගාමියා කුඩා න්‍යෂ්ටික RNA snRNA කුඩා සයිටොප්ලාස්මික් සං signal ා කරන ලද RNA ප්‍රෝටීන් ප්‍රෝටීන් සහ PRNA-සංශ්ලේෂණය කරන ලද RNA sc සංජානන ශරීර සංරචක Antisense RNA anRNA/micRNA ජාන ප්‍රකාශනය නියාමනය කරයි Ribozyme RNA එන්සයිම ක්‍රියාකාරී RNA
2. ප්‍රොකරියෝටික් සහ යුකැරියෝටික් ප්‍රවර්ධකයින් අතර ඇති ප්රධාන වෙනස කුමක්ද?
Prokaryotic TTGACA --- TATAAT------ආරම්භක අඩවිය-35 -10 Eukaryotic Enhancer---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-ආරම්භක අඩවිය-110 -70 -25
3. ස්වාභාවික ප්ලාස්මිඩ කෘතිමව ඉදිකිරීමේ ප්රධාන අංග මොනවාද?
ස්වාභාවික ප්ලාස්මිඩවල බොහෝ විට දෝෂ ඇති බැවින් ඒවා ජාන ඉංජිනේරු විද්යාව සඳහා වාහකයන් ලෙස භාවිතා කිරීමට සුදුසු නොවන අතර ඒවා වෙනස් කර ගොඩනගා ගත යුතුය: a.සාමාන්යයෙන් ප්‍රතිජීවක ජාන තෝරා ගැනීම සඳහා භාවිතා කිරීමට පහසු දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් වැනි සුදුසු තේරීම් සලකුණු ජාන එකතු කරන්න.බී.නැවත ඒකාබද්ධ කිරීම පහසු කිරීම සඳහා සුදුසු එන්සයිම කැපුම් ස්ථාන වැඩි කිරීම හෝ අඩු කිරීම.c.දිග කෙටි කිරීම, අනවශ්‍ය කොටස් කපා දැමීම, ආනයන කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කිරීම සහ පැටවීමේ ධාරිතාව වැඩි කිරීම.ඈඅනුරුව, තද සිට ලිහිල් දක්වා, අඩු පිටපත් සිට වැඩි පිටපත් දක්වා වෙනස් කරන්න.ඊ.ජාන ඉංජිනේරු විද්‍යාවේ විශේෂ අවශ්‍යතා අනුව විශේෂ ජාන මූලද්‍රව්‍ය එකතු කරන්න
4. පටක විශේෂිත cDNA අවකල පිරික්සීමේ ක්‍රමයක් සඳහා උදාහරණයක් දෙන්න?
සෛල ජනගහන දෙකක් සකස් කර ඇති අතර, ඉලක්කගත ජානය එක් සෛලයක ප්‍රකාශිත හෝ ඉහළ ප්‍රකාශිත වන අතර, ඉලක්කගත ජානය අනෙක් සෛලය තුළ ප්‍රකාශිත හෝ පහත් ලෙස ප්‍රකාශ නොවේ, පසුව ඉලක්කගත ජානය දෙමුහුන් කිරීම සහ සංසන්දනය කිරීම මගින් සොයා ගැනේ.උදාහරණයක් ලෙස, පිළිකා ඇතිවීම සහ වර්ධනය අතරතුර, පිළිකා සෛල සාමාන්ය සෛල වලට වඩා වෙනස් ප්‍රකාශන මට්ටම් සහිත mRNA ඉදිරිපත් කරයි.එබැවින්, අවකල දෙමුහුන්කරණය මගින් පිළිකා ආශ්‍රිත ජාන පරීක්ෂා කළ හැක.ප්‍රේරණ ක්‍රමය ප්‍රකාශනය ප්‍රේරණය වන ජාන පරීක්ෂා කිරීමට ද භාවිතා කළ හැක.
5. දෙමුහුන් සෛල රේඛා උත්පාදනය සහ තිරගත කිරීම?
ප්ලීහාව බී සෛල + මයිලෝමා සෛල, සෛල විලයනය ප්‍රවර්ධනය කිරීම සඳහා පොලිඑතිලීන් ග්ලයිකෝල් (PEG) එකතු කිරීම සහ HAT මාධ්‍යයේ (හයිපොක්සැන්තයින්, ඇමිනොප්ටෙරින්, ටී අඩංගු) වගා කරන ලද ස්ප්ලේනික් බී-මයිලෝමා විලයන සෛල පෝෂණය දිගටම ප්‍රසාරණය වේ.සෛල විලයනයෙහි අඩංගු වන්නේ: ප්ලීහාව-ප්ලීහාව විලයන සෛල: වර්ධනය වීමට නොහැකි වීම, ප්ලීහාව සෛල vitro තුළ වගා කළ නොහැක.අස්ථි-අස්ථි විලයන සෛල: හයිපොක්සැන්තයින් භාවිතා කළ නොහැක, නමුත් folate reductase භාවිතයෙන් දෙවන මාර්ගය හරහා පියුරීන් සංස්ලේෂණය කළ හැක.Aminopterin මගින් folate reductase වලක්වන අතර එමගින් වර්ධනය විය නොහැක.අස්ථි-ප්ලීහාව විලයන සෛල: HAT හි වර්ධනය විය හැක, ප්ලීහාව සෛල හයිපොක්සැන්තයින් භාවිතා කළ හැක, සහ අස්ථි සෛල සෛල බෙදීමේ කාර්යය සපයයි.
6. ඩිඩොක්සි පර්යන්ත අවසන් කිරීමේ ක්‍රමය (සැන්ගර් ක්‍රමය) මගින් DNA හි ප්‍රාථමික ව්යුහය නිර්ණය කිරීමේ මූලධර්මය සහ ක්‍රමය කුමක්ද?
DNA වල දිගුව අවසන් කිරීම සඳහා නියුක්ලියෝටයිඩ දාම ටර්මිනේටරය-2,,3,-ඩයිඩොක්සිනියුක්ලියෝටයිඩ භාවිතා කිරීම මූලධර්මයයි.3/5/ෆොස්ෆොඩීස්ටර් බන්ධන සෑදීමට අවශ්‍ය 3-OH එහි නොමැති බැවින්, DNA දාමයට ඇතුළත් කළ පසු, DNA දාමය තවදුරටත් දිගු කළ නොහැක.පාදක යුගල කිරීමේ මූලධර්මයට අනුව, DNA පොලිමරේස් සාමාන්යයෙන් විස්තීරණ DNA දාමයට සහභාගී වීමට dNMP අවශ්‍ය වූ විට, අවස්ථා දෙකක් ඇත, එකක් නම් ddNTP සඳහා සහභාගී වීමයි, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ඩිඔක්සිනියුක්ලියෝටයිඩ දාම දිගුව අවසන් වේ;අනිත් එක තමයි dNTP වලට සහභාගී වීම, එවිට DNA දාමයට මීළඟ ddNTP සංස්ථාගත වන තුරු දිගටම දිගු විය හැක.මෙම ක්‍රමයට අනුව ddNTP වලින් අවසන් වන විවිධ දිගින් යුතු DNA කොටස් සමූහයක් ලබා ගත හැක.ක්‍රමය වන්නේ පිළිවෙලින් ddAMP, ddGMP, ddCMP සහ ddTMP ලෙස කණ්ඩායම් හතරකට බෙදීමයි.ප්‍රතික්‍රියාවෙන් පසුව, පොලිඇක්‍රිලමයිඩ් ජෙල් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් පිහිනුම් පටිවලට අනුව DNA අනුක්‍රමය කියවිය හැකිය.
7. සක්‍රියකාරක ප්‍රෝටීන් (CAP) පිටපත් කිරීම මත ධනාත්මක නියාමන බලපෑම කුමක්ද?
Cyclic adenylate (cAMP) receptor protein CRP (cAMP receptor protein), cAMP සහ CRP සංයෝගයෙන් සෑදෙන සංකීර්ණය CAP (cAMPactivated protein) ලෙස හැඳින්වේ.E. coli ග්ලූකෝස් නොමැති මාධ්‍යයක වගා කළ විට, CAP හි සංස්ලේෂණය වැඩි වන අතර, CAP මගින් ලැක්ටෝස් (Lac) වැනි ප්‍රවර්ධක සක්‍රීය කිරීමේ කාර්යය ඇත.සමහර CRP මත යැපෙන ප්‍රවර්ධකයන්ට පොදු ප්‍රවර්ධකයන්ට ඇති සාමාන්ය -35 කලාප අනුක්‍රමික විශේෂාංගය (TTGACA) නොමැත.එබැවින් RNA පොලිමරේස් එයට බැඳීමට අපහසුය.CAP (ක්‍රියාකාරිත්වය): එන්සයිම සහ ප්‍රවර්ධකයේ බන්ධන නියතය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩිදියුණු කළ හැක.එය ප්රධාන වශයෙන් පහත පැති දෙක පෙන්වයි: ① CAP මඟින් ප්‍රවර්ධකයාගේ අනුකූලතාව සහ එන්සයිමය සමඟ අන්තර්ක්‍රියා වෙනස් කිරීම මගින් එන්සයිම අණුව නිවැරදිව දිශානතියට පත් කිරීමට උපකාර කරයි, එවිට -10 කලාපය සමඟ ඒකාබද්ධ වී -35 කලාපයේ කාර්යය ප්‍රතිස්ථාපනය කිරීමේ කාර්යභාරය ඉටු කරයි.②CAP හට DNA වල අනෙකුත් ස්ථාන වලට RNA පොලිමරේස් බන්ධනය වැලැක්විය හැක, එමගින් එහි නිශ්චිත ප්‍රවර්ධකයාට බන්ධනය වීමේ සම්භාවිතාව වැඩි කරයි.
8. සාමාන්යයෙන් DNA ප්‍රතිසංයෝජන අත්හදා බැලීමකදී ඇතුළත් වන පියවර මොනවාද?
ඒ.දායක ජීවියාගේ ඉලක්කගත ජානය (හෝ බාහිර ජානය) නිස්සාරණය කර, නව ප්‍රතිසංයෝජක DNA අණුවක් සෑදීම සඳහා එය වෙනත් DNA අණුවකට (ක්ලෝන දෛශිකයක්) එන්සයිමය වශයෙන් සම්බන්ධ කරන්න.බී.ප්‍රතිසංයෝජක DNA අණුව ලබන්නාගේ සෛලයට මාරු කර එය ප්‍රතිග්‍රාහක සෛලය තුළ ප්‍රතිවර්තනය කර සංරක්ෂණය කරන්න.මෙම ක්රියාවලිය පරිවර්තනය ලෙස හැඳින්වේ.c.ප්‍රතිසංයෝජක DNA අවශෝෂණය කර ඇති එම ග්‍රාහක සෛල පරීක්ෂා කර හඳුනා ගන්න.ඈවිදේශ ආධාර ජානය ප්‍රකාශ වන්නේද යන්න හඳුනා ගැනීම සඳහා ප්‍රතිසංයෝජක DNA අඩංගු සෛල මහා සංස්කෘතිය.
9. ජාන පුස්තකාලය ඉදිකිරීම ප්‍රතිසංයෝජක පරීක්ෂාව සඳහා ක්‍රම තුනක් ලබා දී ඇති අතර ක්රියාවලිය කෙටියෙන් විස්තර කෙරේ.
ප්‍රතිජීවක ප්රතිරෝධය පිරික්සීම, ප්රතිරෝධය ඇතුළත් කිරීමේ අක්‍රිය කිරීම, නිල්-සුදු ලප පරීක්ෂාව හෝ PCR පරීක්ෂාව, අවකල පිරික්සීම, DNA පරීක්ෂණය බොහෝ ක්ලෝනකරණ වාහකයන් ප්‍රතිජීවක ප්‍රතිරෝධක ජාන (ඇම්පිසිලින් විරෝධී, ටෙට්‍රාසයික්ලයින්) දරයි.ප්ලාස්මිඩය Escherichia coli වෙත මාරු කරන විට, බැක්ටීරියා ප්රතිරෝධය ලබා ගනී, මාරු නොවන ඒවාට ප්රතිරෝධයක් නොමැත.නමුත් එය ප්‍රතිසංවිධානය කර තිබේද නැද්ද යන්න වෙන්කර හඳුනාගත නොහැක.ප්‍රතිරෝධක ජාන දෙකක් අඩංගු දෛශිකයක, එක් ජානයකට විදේශීය DNA කැබැල්ලක් ඇතුළු කර ජානය අක්‍රිය කිරීමට හේතු වන්නේ නම්, ධනාත්මක ප්‍රතිසංයෝජන සඳහා පරීක්ෂා කිරීමට විවිධ ඖෂධ අඩංගු තහඩු පාලන දෙකක් භාවිතා කළ හැකිය.නිදසුනක් ලෙස, pUC ප්ලාස්මිඩයේ LacZ ජානය (කේතනය β-galactosidase) අඩංගු වේ, එමඟින් X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) වර්ණදේහ උපස්ථරය වියෝජනය කර නිල් පැහැයට හැරේ.විදේශීය DNA ඇතුල් කළ විට, LacZ ජානය ප්‍රකාශ කළ නොහැකි අතර, ප්‍රතිසංයෝජක බැක්ටීරියාව තිරගත වන පරිදි වික්‍රියාව සුදු වේ.
10. කළල ප්‍රාථමික සෛල හරහා සංක්‍රාන්ති සත්වයන් ලබා ගැනීමේ මූලික ක්රියාවලිය පැහැදිලි කරන්න?
කලල ප්‍රාථමික සෛල (ES) යනු කලල වර්ධනයේදී කලල සෛල වන අතර ඒවා කෘතිමව වගා කර ප්‍රගුණනය කළ හැකි අතර අනෙකුත් සෛල වර්ග වලට වෙනස් කිරීමේ කාර්යයක් ඇත.ES සෛල සංස්කෘතිය: බ්ලාස්ටොසිස්ට් වල අභ්‍යන්තර සෛල ස්කන්ධය හුදකලා වී වගා කෙරේ.ES පෝෂක රහිත ස්ථරයක වගා කළ විට, එය මාංශ පේශි සෛල සහ N සෛල වැනි විවිධ ක්‍රියාකාරී සෛල වලට වෙනස් වේ.ෆයිබ්‍රොබ්ලාස්ට් අඩංගු මාධ්‍යයක වගා කළ විට, ES අවකලනය කිරීමේ ක්‍රියාකාරිත්වය පවත්වා ගනී.ES ජානමය වශයෙන් හැසිරවිය හැකි අතර, එහි අවකලනය ශ්‍රිතයට බලපෑම් නොකර අනුකලනය කළ හැකි අතර, එය අහඹු අනුකලනය පිළිබඳ ගැටළුව විසඳයි.කලල ප්‍රාථමික සෛල තුළට බාහිර ජාන හඳුන්වා දීම, පසුව ගැබිනි ගැහැණු මීයන්ගේ ගර්භාෂය තුළට බද්ධ කිරීම, පැටවුන් බවට පත් කිරීම සහ සමලිංගික මීයන් ලබා ගැනීම සඳහා හරස් කිරීම.
