පුපුරා යාමේ මුල් අවධියේදී, වේගවත් වර්ධනය හේතුවෙන්, සැක සහිත රෝගීන්ගේ වේගවත් රෝග විනිශ්චය COVID-19 වැළැක්වීමේ යතුරයි.සමහර අනුමත න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ ප්රතික්රියාකාරක කෙටි සංවර්ධන කාලයක් ඇති අතර, ඉක්මන් කාර්ය සාධනය තහවුරු කිරීම, ප්රමාණවත් නොවන ප්රතික්රියාකාරක ප්‍රශස්තකරණය සහ කණ්ඩායම් අතර විශාල වෙනස්කම් වැනි ගැටළු තිබේ;න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ ක්‍රියාවලියේ විවිධ පැතිවල විවිධ සායනික රසායනාගාරවල ගැටලු න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ ප්‍රතිඵලවල නිරවද්‍යතාවයට ද බලපෑ හැකිය.මෙම ලිපිය වත්මන් SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ ප්‍රධාන සබැඳි සහ කරුණු කෙරෙහි අවධානය යොමු කරනු ඇති අතර රසායනාගාර න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීම් සහ සායනික නොගැලපීම පිළිබඳ ව්‍යාජ සෘණාත්මක සහ ධනාත්මක නැවත පරීක්ෂා කිරීමේ ගැටළු විශ්ලේෂණය කරනු ඇත.
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ මූලධර්ම
SARS-CoV-2 යනු ප්‍රෝටීන 10ක් ඵලදායි ලෙස කේතනය කළ හැකි ජාන 10ක් සහිත, 29 kb පමණ ප්‍රවේණි අනුක්‍රමයක් සහිත RNA වෛරසයකි.වෛරස් RNA සහ ප්‍රෝටීන් වලින් සමන්විත වන අතර පිටතම ස්ථරය ලිපිඩ සහ ග්ලයිකොප්‍රෝටීන වලින් සමන්විත බාහිර ආලේපනයකි.ඇතුළත, ප්‍රෝටීන් කැප්සිඩය RNA එහි ඔතා, එමඟින් පහසුවෙන් දිරාපත් විය හැකි RNA (P1) ආරක්ෂා කරයි.
SARS-COV-2 හි P1 ව්‍යුහය
වෛරස් ආසාදනය ඇති කිරීමට විශේෂිත සෛල මතුපිට ප්‍රතිග්‍රාහක හරහා සෛල ආක්‍රමණය කරන අතර ප්‍රතිවර්තනය කිරීමට ධාරක සෛල භාවිතා කරයි.
වෛරස් න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ මූලධර්මය වන්නේ සෛල ලයිසේට් හරහා වෛරස් ආර්එන්ඒ හෙළිදරව් කිරීම, පසුව හඳුනාගැනීම සඳහා තත්කාලීන ප්රතිදීප්ත ප්රතිවර්තන-පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව (RT-PCR) භාවිතා කිරීමයි.
හඳුනාගැනීමේ මූලධර්මයේ යතුර වන්නේ න්යෂ්ටික අම්ල අනුපිළිවෙලෙහි “ඉලක්කගත ගැලපීම” සාක්ෂාත් කර ගැනීම සඳහා ප්‍රයිමර් සහ ප්‍රොබ් භාවිතා කිරීමයි, එනම්, භෂ්ම 30,000 ක පමණ අනෙකුත් වෛරස් වලට වඩා වෙනස් වන SARS-CoV-2 හි න්යෂ්ටික අම්ල අනුක්‍රමය සොයා ගැනීම (නියුක්ලික් අම්ලය අනෙකුත් වෛරස් වලට සමාන වීම) ප්‍රයිමර් සහ ප්‍රොබ් සැලසුම් කිරීම.
ප්‍රයිමර් සහ පරීක්ෂණ SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ලයේ නිශ්චිත කලාපය සමඟ බෙහෙවින් ගැලපේ, එනම් විශේෂත්වය ඉතා ප්‍රබල වේ.පරීක්ෂා කිරීමට නියමිත නියැදියේ තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR විස්තාරණ ප්රතිඵලය ධනාත්මක වූ පසු, එය සාම්පලයේ SARS-CoV-2 පවතින බව සනාථ කරයි.P2 බලන්න.
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල නිර්ණය කිරීමේ P2 පියවර (තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR)
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීම සඳහා රසායනාගාරයේ කොන්දේසි සහ අවශ්‍යතා
න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ රසායනාගාර ඍණාත්මක පීඩන පරිසරයන් සඳහා වඩාත් සුදුසු වන අතර, ඔවුන් පීඩනය නිරීක්ෂණය කිරීම, වාතය ගලා යාම සහ aerosol ඉවත් කිරීම කෙරෙහි අවධානය යොමු කළ යුතුය.න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ කාර්ය මණ්ඩලයට අනුරූප සුදුසුකම් තිබිය යුතු අතර, අදාළ පොලිමරේස් දාම ප්‍රතික්‍රියා පුහුණුව ලබාගෙන ඇගයීම සමත් විය යුතුය.රසායනාගාරය දැඩි ලෙස කළමනාකරණය කළ යුතුය, කලාපකරණය කළ යුතුය, අදාළ නොවන පුද්ගලයින්ට ඇතුළුවීම සපුරා තහනම්ය.පිරිසිදු ප්රදේශය වාතාශ්රය සහ ස්ථානයේ විෂබීජහරණය කළ යුතුය.අදාළ අයිතම කලාපවල තබා, පිරිසිදු හා අපිරිසිදු ඒවා වෙන් කර, නියමිත වේලාවට ප්‍රතිස්ථාපනය කර, එම ස්ථානයේ අපවිත්‍ර කරනු ලැබේ.සාමාන්‍ය විෂබීජ නාශක: ක්ලෝරීන් අඩංගු විෂබීජ නාශක විශාල ප්‍රදේශ සඳහා ප්‍රධාන විසඳුම වන අතර කුඩා ප්‍රදේශ සඳහා 75% ඇල්කොහොල් භාවිතා කළ හැකිය.Aerosols සමඟ කටයුතු කිරීමට හොඳ ක්රමයක් වන්නේ වාතාශ්රය සඳහා කවුළු විවෘත කිරීම වන අතර, පාරජම්බුල කිරණ, පෙරීම සහ වායු විෂබීජ නාශක මගින් වායු විෂබීජ නාශක ද සිදු කළ හැකිය.
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල නිර්ණය කිරීමේ ප්‍රධාන සබැඳි සහ පරාමිතීන් (තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR)
රසායනාගාර සාමාන්‍යයෙන් න්යෂ්ටික අම්ල “හඳුනා ගැනීම” කෙරෙහි දැඩි අවධානයක් යොමු කළද, ඇත්ත වශයෙන්ම, න්යෂ්ටික අම්ල “නිස්සාරණය” සාර්ථක හඳුනාගැනීමේ ප්‍රධාන පියවරයන්ගෙන් එකකි, එය වෛරස් සාම්පල එකතු කිරීම සහ ගබඩා කිරීම සමඟ සමීපව සම්බන්ධ වේ.
වර්තමානයේ, නාසෝෆරින්ජියල් ස්පුබ් වැනි බහුලව භාවිතා වන ශ්වසන සාම්පල, න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සහ ලයිසිස් ද්රාවණය මත පදනම්ව සකස් කරන ලද අක්රිය (සංරක්ෂණ) විසඳුමක් වන දෙවන ක්රමය භාවිතා කරයි.එක් අතකින්, මෙම වෛරස් සංරක්ෂණ ද්රාවණය වෛරසයේ ප්‍රෝටීන් ප්‍රතික්ෂේප කළ හැකි අතර, එහි ක්‍රියාකාරිත්වය නැති වී තවදුරටත් බෝ නොවන අතර ප්‍රවාහනය සහ හඳුනාගැනීමේ අදියරෙහි ආරක්ෂාව වැඩි දියුණු කළ හැකිය;අනෙක් අතට, එය න්යෂ්ටික අම්ලය මුදා හැරීමට, න්යෂ්ටික අම්ල දිරාපත්වන එන්සයිමය ඉවත් කිරීමට සහ වෛරසය වැලැක්වීමට සෘජුවම වෛරසය බිඳ දැමිය හැකිය.RNA ක්ෂය වී ඇත.
න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණ ලයිසිස් ද්‍රාවණයේ පදනම මත සකස් කරන ලද වෛරස් නියැදි විසඳුමක්.ප්‍රධාන සංරචක වන්නේ සමතුලිත ලවණ, ethylenediaminetetraacetic අම්ලය chelating කාරකය, guanidine ලුණු (guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, ආදිය), anionic surfactant (dodecane) සෝඩියම් සල්ෆේට්), cationic surfactant (tetradecyl-ඔක්සිලියම්, ටයිමෙල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිල්තයිනොක්සයිල්, ටයිමෙටේල් 8, othreitol, proteinase K සහ අනෙකුත් සංරචක කිහිපයක් හෝ වැඩි ගණනක්.වර්තමානයේ, න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණ කට්ටල වර්ග බොහොමයක් ඇති අතර, විවිධ න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සහ පිරිසිදු කිරීමේ ප්රතික්රියාකාරක භාවිතා වේ.එකම න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සහ පිරිසිදු කිරීමේ ප්‍රතික්‍රියාකාරකය භාවිතා කළද, එක් එක් කට්ටලයේ නිස්සාරණ ක්‍රියා පටිපාටි වෙනස් වේ.
වර්තමානයේ, ජාතික වෛද්ය නිෂ්පාදන පරිපාලනය විසින් අනුමත කරන ලද න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ කට්ටල නිෂ්පාදන තෝරාගනු ලබන්නේ SARS-CoV-2 ජෙනෝමයේ ඇති ORF1ab, E සහ N ජාන මත පදනම්වය.විවිධ නිෂ්පාදනවල හඳුනාගැනීමේ මූලධර්ම මූලික වශයෙන් සමාන වේ, නමුත් ඒවායේ ප්‍රාථමික සහ පරීක්ෂණ සැලසුම් වෙනස් වේ.තනි-ඉලක්ක කොටස් (ORF1ab), ද්විත්ව ඉලක්ක කොටස් (ORF1ab, N හෝ E) සහ ඉලක්ක තුනක් (ORF1ab, N සහ E) ඇත.හඳුනාගැනීම සහ අර්ථ නිරූපණය, න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සහ තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතිය අතර වෙනස අදාළ කට්ටල උපදෙස් වෙත යොමු විය යුතු අතර, පරිවර්ථනය සඳහා කට්ටල උපදෙස්වල දක්වා ඇති අර්ථකථන ක්රමය භාවිතා කරන්නන් දැඩි ලෙස අනුගමනය කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR මගින් විස්තාරණය කරන ලද පොදු කලාප, ප්‍රාථමික සහ පරීක්ෂණ අනුපිළිවෙල P3 හි පෙන්වා ඇත.
P3 ජෙනෝමය මත SARS-CoV-2 ඇම්ප්ලිකන් ඉලක්කයේ පිහිටීම සහ ප්‍රයිමර් සහ පරීක්ෂණ අනුපිළිවෙල
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල නිර්ණය කිරීමේ ප්රතිඵල අර්ථ නිරූපණය (Real-Time fluorescent RT-PCR)
“SARS-CoV-2 ආසාදනය සඳහා නියුමෝනියාව වැළැක්වීම සහ පාලන සැලැස්ම (දෙවන සංස්කරණය)” පළමු වරට තනි ජාන විස්තාරණය කිරීමේ ප්රතිඵල විනිශ්චය කිරීමේ නිර්ණායක පැහැදිලි කළේය:
1. Ct හෝ Ct≥40 සෘණ නැත;
2. Ct<37 ධනාත්මක වේ;
3. Ct අගය 37-40 යනු අළු පරිමාණ ප්‍රදේශයයි.අත්හදා බැලීම නැවත කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.Ct<40 ප්‍රතිනිර්මාණය කිරීමේ ප්රතිඵලය සහ විස්තාරණ වක්‍රය පැහැදිලි උච්ච සහිත නම්, නියැදිය ධනාත්මක ලෙස විනිශ්චය කරනු ලැබේ, එසේ නොවුවහොත් එය ඍණ වේ.
මාර්ගෝපදේශයේ තුන්වන සංස්කරණය සහ මාර්ගෝපදේශයේ සිව්වන සංස්කරණය ඉහත නිර්ණායක දිගටම කරගෙන ගියේය.කෙසේ වෙතත්, වාණිජ කට්ටලවල භාවිතා වන විවිධ ඉලක්ක හේතුවෙන්, නිෂ්පාදකයා විසින් සපයනු ලබන උපදෙස් බලපැවැත්වෙන බව අවධාරණය කරමින්, මාර්ගෝපදේශයේ ඉහත 3 වන සංස්කරණය ඉලක්ක සංයෝජනය තීරණය කිරීමේ නිර්ණායක ලබා දී නොමැත.මාර්ගෝපදේශවල පස්වන සංස්කරණයේ සිට, ඉලක්ක දෙකක් පැහැදිලි කර ඇත, විශේෂයෙන් විනිශ්චය කිරීමට අපහසු තනි ඉලක්කයක් සඳහා වන විනිශ්චය නිර්ණායක.එනම්, රසායනාගාරයට SARS-CoV-2 නියුක්ලෙයික් අම්ලය හඳුනාගැනීම සඳහා යම් සිද්ධියක් ධනාත්මක බව තහවුරු කිරීමට අවශ්ය නම්, පහත සඳහන් කොන්දේසි 2න් 1ක් සපුරාලීම අවශ්ය වේ:
(1) එකම නියැදියක ඇති SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) ඉලක්ක දෙකක් තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR මගින් ධනාත්මක බව පරීක්ෂා කෙරේ.තනි ඉලක්කයක් ධනාත්මක නම්, නැවත නියැදීම සහ නැවත පරීක්ෂා කිරීම අවශ්ය වේ.පරීක්ෂණ ප්රතිඵල නම් තනි ඉලක්කය තවමත් ධනාත්මක නම්, එය ධනාත්මක ලෙස විනිශ්චය කරනු ලැබේ.
(2) තත්‍ය කාලීන ප්රතිදීප්ත RT-PCR සාම්පල දෙකක් එකවර තනි ඉලක්කයක් ධනාත්මක බව පෙන්නුම් කරන ලදී හෝ එකම වර්ගයේ සාම්පල දෙකක් ධනාත්මක ලෙස විනිශ්චය කළ හැකි තනි ඉලක්ක ධනාත්මක පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵලයක් පෙන්නුම් කළේය.කෙසේ වෙතත්, න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂාවෙහි ඍණාත්මක ප්රතිඵල SARS-CoV-2 ආසාදනය බැහැර කළ නොහැකි බව මාර්ගෝපදේශ අවධාරණය කරයි.දුර්වල සාම්පල ගුණාත්මක භාවය (ඔරොෆරින්ක්ස් සහ අනෙකුත් කොටස් වලින් ස්වසන සාම්පල), නියැදි එකතු කිරීම ඉතා ඉක්මනින් හෝ ප්‍රමාද වීම, නියැදි නිවැරදිව ගබඩා කිරීම, ප්‍රවාහනය කිරීම සහ සැකසීම සිදු නොකළ අතර තාක්‍ෂණයට ම ගැටලු (වෛරස් විචලනය, PCR නිෂේධනය) ඇතුළු ව්‍යාජ නිෂේධන ඇති කළ හැකි සාධක බැහැර කළ යුතුය.
SARS-CoV-2 හඳුනාගැනීමේදී ව්‍යාජ සෘණාත්මක හේතු
දැනට සැලකිලිමත් වන න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණයේ "ව්‍යාජ සෘණ" යන සංකල්පය බොහෝ විට "ව්‍යාජ සෘණ" වෙත යොමු කරයි, එහි න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ ප්රතිඵල සායනික ප්‍රකාශනයන්ට නොගැලපෙන, එනම් සායනික රෝග ලක්ෂණ සහ රූපකරණ ප්රතිඵල COVID-19 පිළිබඳව බෙහෙවින් සැක කෙරේ, නමුත් න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ සෑම විටම බොහෝ විට "ඍණ" වේ.ජාතික සෞඛ්‍ය කොමිසමේ සායනික රසායනාගාර මධ්‍යස්ථානය "ව්‍යාජ සෘණ" SARS-CoV-2 පරීක්ෂණය පැහැදිලි කළේය.
(1) ආසාදිත පුද්ගලයාගේ සෛල තුළ යම් වෛරස් ප්‍රමාණයක් පවතී.පවතින දත්ත වලින් පෙන්නුම් කරන්නේ ශරීරය වෛරසයෙන් ආසාදනය වූ පසු, වෛරසය නාසය සහ මුඛය හරහා උගුරට ඇතුළු වන අතර පසුව ට්‍රේචියා සහ බ්රොන්කයි වෙත ගොස් ඇල්වෙයෝලි වෙත ළඟා වන බවයි.ආසාදිත පුද්ගලයා පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කාලය, මෘදු රෝග ලක්ෂණ, පසුව දරුණු රෝග ලක්ෂණ ක්රියාවලිය සහ රෝගයේ විවිධ අවධීන් අත්විඳිනු ඇත.තවද ශරීරයේ විවිධ කොටස්වල පවතින වෛරස් ප්රමාණය වෙනස් වේ.
සෛල වර්ගවල වෛරස් බර අනුව, ඇල්ටෙයෝලර් එපිටිලියල් සෛල (පහළ ශ්වසන පත්රිකාව)> ගුවන් මාර්ග එපිටිලියල් සෛල (ඉහළ ශ්වසන පත්රිකාව)> ෆයිබ්‍රොබ්ලාස්ට්, එන්ඩොතලියල් සෛල සහ මැක්‍රෝෆේජ් යනාදිය;නියැදි වර්ගය අනුව, ඇල්ටෙයෝලර් සේදීමේ තරලය (වඩාත්ම විශිෂ්ටයි)>ගැඹුරු කැස්ස sputum>නාසෝෆරින්ජියල් තුවාලය>ඔරොෆරින්ජියල් ස්පුබ්>රුධිරය.මීට අමතරව, වෛරසය මළපහ තුළද හඳුනාගත හැකිය.කෙසේ වෙතත්, ශල්‍යකර්මයේ පහසුව සහ රෝගීන්ගේ පිළිගැනීම සැලකිල්ලට ගනිමින්, බහුලව භාවිතා වන සායනික සාම්පල අනුපිළිවෙල වන්නේ oropharyngeal swab>nasopharyngeal swab>bronchial lavage fluid (සංකීර්ණ මෙහෙයුම) සහ ගැඹුරු sputum (සාමාන්‍යයෙන් වියළි කැස්ස, ලබා ගැනීමට අපහසු) .
එමනිසා, සමහර රෝගීන්ගේ ඔෙරෆරින්ක්ස් හෝ නාසෝෆරින්ක්ස් වල සෛලවල වෛරස් ප්රමාණය කුඩා හෝ අතිශයින් අඩු වේ.පරීක්ෂණය සඳහා ඔෙරෆරින්ක්ස් හෝ නාසෝෆරින්ක්ස් සාම්පල පමණක් ලබා ගන්නේ නම්, වෛරස් න්යෂ්ටික අම්ලය අනාවරණය නොවේ.
(2) නියැදි එකතු කිරීමේදී වෛරස් අඩංගු සෛල එකතු කර නැත, නැතහොත් වෛරස් නියුක්ලික් අම්ලය ඵලදායී ලෙස සංරක්ෂණය කර නොමැත.
[① නුසුදුසු එකතු කිරීමේ ස්ථානය, උදාහරණයක් ලෙස, oropharyngeal swabs එකතු කරන විට, එකතු කිරීමේ ගැඹුර ප්රමාණවත් නොවේ, එකතු කරන ලද nasopharyngeal swabs නාසික කුහරය තුළ ගැඹුරට එකතු නොවේ, ආදිය. එකතු කරන ලද සෛල බොහොමයක් වෛරස්-නිදහස් සෛල විය හැක;
②නියැදි ස්පුබ් වැරදි ලෙස භාවිතා වේ.නිදසුනක් ලෙස, ස්පුබ් හිසෙහි ද්රව්ය සඳහා PE ෆයිබර්, පොලියෙස්ටර් ෆයිබර් සහ පොලිප්රොපිලීන් තන්තු වැනි කෘතිම තන්තු නිර්දේශ කරනු ලැබේ.කපු වැනි ස්වභාවික තන්තු සත්‍ය ක්‍රියාකාරිත්වයේ දී භාවිතා වේ (ප්‍රෝටීන් වල ශක්තිමත් අවශෝෂණය සහ සේදීමට පහසු නොවේ) සහ නයිලෝන් තන්තු (දුර්වල ජල අවශෝෂණය, ප්රමාණවත් නොවන නියැදි පරිමාවකට තුඩු දෙයි);
③නියුක්ලෙයික් අම්ල (ඩීඑන්ඒ/ආර්එන්ඒ) අවශෝෂණය කර ගැනීමට පහසු පොලිප්රොපිලීන් හෝ පොලිඑතිලීන් ප්ලාස්ටික් ගබඩා නල අනිසි ලෙස භාවිතා කිරීම වැනි වෛරස් ගබඩා නල වැරදි ලෙස භාවිතා කිරීම, ගබඩා ද්‍රාවණයේ න්යෂ්ටික අම්ල සාන්ද්‍රණය අඩුවීමට හේතු වේ.ප්රායෝගිකව, වෛරස් න්යෂ්ටික අම්ල ගබඩා කිරීම සඳහා පොලිඑතිලීන්-ප්රොපිලීන් පොලිමර් ප්ලාස්ටික් සහ විශේෂයෙන් ප්රතිකාර කරන ලද පොලිප්රොපිලීන් ප්ලාස්ටික් බහාලුම් භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.]
[① නුසුදුසු එකතු කිරීමේ ස්ථානය, උදාහරණයක් ලෙස, oropharyngeal swabs එකතු කරන විට, එකතු කිරීමේ ගැඹුර ප්රමාණවත් නොවේ, එකතු කරන ලද nasopharyngeal swabs නාසික කුහරය තුළ ගැඹුරට එකතු නොවේ, ආදිය. එකතු කරන ලද සෛල බොහොමයක් වෛරස්-නිදහස් සෛල විය හැක;
②නියැදි ස්පුබ් වැරදි ලෙස භාවිතා වේ.නිදසුනක් ලෙස, ස්පුබ් හිසෙහි ද්රව්ය සඳහා PE ෆයිබර්, පොලියෙස්ටර් ෆයිබර් සහ පොලිප්රොපිලීන් තන්තු වැනි කෘතිම තන්තු නිර්දේශ කරනු ලැබේ.කපු වැනි ස්වභාවික තන්තු සත්‍ය ක්‍රියාකාරිත්වයේ දී භාවිතා වේ (ප්‍රෝටීන් වල ශක්තිමත් අවශෝෂණය සහ සේදීමට පහසු නොවේ) සහ නයිලෝන් තන්තු (දුර්වල ජල අවශෝෂණය, ප්රමාණවත් නොවන නියැදි පරිමාවකට තුඩු දෙයි);
③නියුක්ලෙයික් අම්ල (ඩීඑන්ඒ/ආර්එන්ඒ) අවශෝෂණය කර ගැනීමට පහසු පොලිප්රොපිලීන් හෝ පොලිඑතිලීන් ප්ලාස්ටික් ගබඩා නල අනිසි ලෙස භාවිතා කිරීම වැනි වෛරස් ගබඩා නල වැරදි ලෙස භාවිතා කිරීම, ගබඩා ද්‍රාවණයේ න්යෂ්ටික අම්ල සාන්ද්‍රණය අඩුවීමට හේතු වේ.ප්රායෝගිකව, වෛරස් න්යෂ්ටික අම්ල ගබඩා කිරීම සඳහා පොලිඑතිලීන්-ප්රොපිලීන් පොලිමර් ප්ලාස්ටික් සහ විශේෂයෙන් ප්රතිකාර කරන ලද පොලිප්රොපිලීන් ප්ලාස්ටික් බහාලුම් භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.]
(4) සායනික රසායනාගාර මෙහෙයුම සම්මත නොවේ.නියැදි ප්‍රවාහන සහ ගබඩා තත්ත්වයන්, සායනික රසායනාගාරවල ප්‍රමිතිගත ක්‍රියාකාරිත්වය, ප්රතිඵල අර්ථ නිරූපණය සහ තත්ත්ව පාලනය පරීක්ෂණ ප්‍රතිඵලවල නිරවද්‍යතාවය සහ විශ්වසනීයත්වය සහතික කිරීම සඳහා ප්‍රධාන සාධක වේ.ජාතික සෞඛ්‍ය කොමිෂන් සභාවේ සායනික රසායනාගාර මධ්‍යස්ථානය විසින් 2020 මාර්තු 16-24 දිනවල සිදු කරන ලද බාහිර තත්ත්ව ඇගයීමේ ප්‍රතිඵලවලට අනුව වලංගු ප්රතිඵල ලැබුණු රසායනාගාර 844 න් 701 (83.1%) සුදුසුකම් ලබා ඇති අතර 143 (16.9%) සුදුසුකම් ලබා නොතිබුණි.සුදුසුකම් ලත්, සමස්ත රසායනාගාර පරීක්ෂණ තත්ත්වයන් යහපත් වේ, නමුත් විවිධ රසායනාගාරවල තවමත් පුද්ගල මෙහෙයුම් හැකියාව, තනි ඉලක්ක ධනාත්මක නියැදි අර්ථකථන හැකියාව සහ තත්ත්ව පාලනයෙහි වෙනස්කම් ඇත.
SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ ව්‍යාජ ඍණ අඩු කරන්නේ කෙසේද?
න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේදී ව්‍යාජ ඍණ අඩු කිරීම ව්‍යාජ සෘණ නිපදවීමේ අංශ හතරෙන් ප්‍රශස්ත කළ යුතුය.
(1)ආසාදිත පුද්ගලයාගේ සෛල තුළ යම් වෛරස් ප්‍රමාණයක් පවතී.ආසාදිත බවට සැක කෙරෙන පුද්ගලයන්ගේ ශරීරයේ විවිධ කොටස්වල වෛරසයේ සාන්ද්‍රණය විවිධ අවස්ථාවලදී වෙනස් වේ.ෆරින්ක්ස් නොමැති නම්, එය බ්රොන්පයිල් ලැවේජ් තරල හෝ මලපහ තුළ විය හැකිය.විවිධ වර්ගයේ සාම්පල එකවර හෝ රෝග වර්ධනයේ විවිධ අවස්ථා වලදී පරීක්ෂා කිරීම සඳහා එකතු කර ගත හැකි නම්, ව්‍යාජ නිෂේධනයන් වළක්වා ගැනීමට උපකාරී වේ.
(2) නියැදි එකතු කිරීමේදී වෛරස් අඩංගු සෛල එකතු කළ යුතුය.නියැදි එකතු කරන්නන් පුහුණු කිරීම ශක්තිමත් කිරීමෙන් මෙම ගැටලුව බොහෝ දුරට විසඳිය හැකිය.
(3) විශ්වසනීය IVD ප්රතික්රියාකාරක.ජාතික මට්ටමින් ප්රතික්රියාකාරක හඳුනාගැනීමේ කාර්ය සාධනය ඇගයීම පිළිබඳ පර්යේෂණ සිදු කිරීමෙන් සහ පවතින ගැටලු සාකච්ඡා කිරීමෙන් ප්රතික්රියාකාරක හඳුනාගැනීමේ කාර්යක්ෂමතාව තවදුරටත් වැඩිදියුණු කළ හැකි අතර විශ්ලේෂණවල සංවේදීතාව වැඩි දියුණු කළ හැකිය.
(4) සායනික රසායනාගාරවල ප්‍රමිතිගත ක්‍රියාකාරිත්වය.රසායනාගාර සේවකයින්ගේ පුහුණුව ශක්තිමත් කිරීම, රසායනාගාර තත්ත්ව කළමනාකරණ පද්ධතිය අඛණ්ඩව වැඩිදියුණු කිරීම, සාධාරණ බෙදීම් සහතික කිරීම සහ පුද්ගලයින්ගේ හඳුනාගැනීමේ හැකියාව වැඩිදියුණු කිරීම, නුසුදුසු රසායනාගාර මෙහෙයුම් හේතුවෙන් ව්‍යාජ නිෂේධනයන් අවම කර ගත හැකිය.
සුවය ලබා පිටව ගිය රෝගීන්ගේ SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණයේ ධනාත්මක බව නැවත පරීක්ෂා කිරීමට හේතු
“COVID-19 රෝග විනිශ්චය සහ ප්රතිකාර සැලැස්ම (අත්හදා බැලීමේ හත්වන සංස්කරණය)” පැහැදිලිවම නියම කර ඇත්තේ COVID-19 රෝගීන් සුව කර රෝහලෙන් පිටවීම සඳහා වන එක් නිර්ණායකයක් නම්, අඛණ්ඩ ශ්වසන පත්‍රිකා සාම්පල දෙකක ඍණාත්මක න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණයක් තිබීමයි (අවම වශයෙන් පැය 24 ක පරතරයකින් න්යෂ්ටික විසර්ජන රෝගීන්ට නැවත ධනාත්මක විසර්ජනයක් සිදු විය.) විවිධ හේතු නිසා.
(1)SARS-CoV-2 යනු නව වෛරසයකි.එහි ව්යාධිජනක යාන්ත්රණය, ඇති වූ රෝගය පිළිබඳ සම්පූර්ණ චිත්රය සහ රෝගී පාඨමාලාවේ ලක්ෂණ තවදුරටත් අවබෝධ කර ගැනීම අවශ්ය වේ.එබැවින්, එක් අතකින්, මුදා හරින ලද රෝගීන්ගේ කළමනාකරණය ශක්තිමත් කිරීම සහ දින 14 ක වෛද්ය නිරීක්ෂණ පැවැත්වීම අවශ්ය වේ.රෝගය ඇතිවීම, වර්ධනය සහ ප්රතිඵලය පිළිබඳ සමස්ත ක්රියාවලිය පිළිබඳ අවබෝධය ගැඹුරු කිරීම සඳහා පසු විපරම්, සෞඛ්‍ය නිරීක්ෂණ සහ සෞඛ්‍ය මග පෙන්වීම සිදු කරන්න.
(2) රෝගියාට නැවතත් වෛරසය ආසාදනය විය හැක.ශාස්ත්‍රාලිකයෙකු වන Zhong Nanshan පැවසුවේ: සුව වූ රෝගීන්ට ප්‍රතිදේහ ඇති බැවින්, SARS-CoV-2 නැවත ආක්‍රමණය කරන විට ප්‍රතිදේහ මගින් ඉවත් කළ හැකිය.බොහෝ හේතු තිබේ, ඒවා යථා තත්ත්වයට පත් වූ රෝගියාට හේතුව විය හැකිය, නැතහොත් එය වෛරසයේ විකෘතියට සම්බන්ධ විය හැකිය, නැතහොත් රසායනාගාර පරීක්ෂණවල හේතුව පවා විය හැකිය.එය වෛරසයම නම්, SARS-CoV-2 විකෘතිය මගින් සුවය ලැබූ රෝගියා විසින් නිපදවන ප්‍රතිදේහ විකෘති වූ වෛරසයට එරෙහිව අකාර්යක්ෂම විය හැක.රෝගියා නැවත විකෘති වෛරසය ආසාදනය වී ඇත්නම්, න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණය නැවතත් ධනාත්මක විය හැක.
(3) රසායනාගාර පරීක්ෂණ ක්‍රම සම්බන්ධයෙන් ගත් කල, එක් එක් පරීක්ෂණ ක්‍රමයට එහි සීමාවන් ඇත.SARS-CoV-2 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනා ගැනීම ජාන අනුක්‍රමය තේරීම, ප්රතික්රියාකාරක සංයුතිය, ක්‍රමයේ සංවේදීතාව සහ වෙනත් හේතූන් නිසා පවතින කට්ටලවලට තමන්ගේම අඩු හඳුනාගැනීමේ සීමාවන් ඇත.රෝගියාට ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසු ශරීරයේ වෛරසය අඩු වේ.පරීක්ෂා කළ යුතු සාම්පලයේ වෛරස් භාරය හඳුනාගැනීමේ පහළ සීමාවට වඩා අඩු වන විට, "ඍණාත්මක" ප්රතිඵලය දිස්වනු ඇත.කෙසේ වෙතත්, මෙම ප්රතිඵලය ශරීරයේ වෛරසය සම්පූර්ණයෙන්ම අතුරුදහන් වී ඇති බවක් අදහස් නොවේ.ප්‍රතිකාරය නැවැත්වීමෙන් පසුව වෛරසය ඇතිවිය හැක.පුනර්ජීවනය", පිටපත් කිරීම දිගටම කරගෙන යන්න.එමනිසා, විසර්ජනයෙන් පසු සති 2 සිට 4 දක්වා සතියකට වරක් සමාලෝචනය කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.
(4) න්යෂ්ටික අම්ලය වෛරසයේ ජානමය ද්රව්යය වේ.රෝගියා ප්‍රතිවෛරස් ප්රතිකාර ලබා ගැනීමෙන් පසුව වෛරසය මිය යයි, නමුත් ඉතිරි වෛරස් RNA කොටස් තවමත් මිනිස් සිරුරේ රඳවා තබා ඇති අතර ශරීරයෙන් සම්පූර්ණයෙන්ම බැහැර නොවේ.සමහර අවස්ථාවලදී, යම් යම් තත්වයන් යටතේ, එය වඩාත් රඳවා තබා ගත හැකිය.දිගු කාලයක්, සහ මෙම අවස්ථාවේදී න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණය "අස්ථිර" ධනාත්මක වනු ඇත.රෝගියාගේ ප්‍රකෘතිමත් වීමේ කාලය දීර්ඝ වීමත් සමඟ ශරීරයේ ඉතිරිව ඇති RNA කොටස් ක්‍රමයෙන් අවසන් වූ පසු, න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ ප්රතිඵලය ඍණාත්මක විය හැක.
(5) SARS-CoV-2 හි න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණ ප්රතිඵලය වෛරස් RNA වල පැවැත්ම හෝ නොමැති බව පමණක් සනාථ කරන අතර වෛරසයේ ක්‍රියාකාරිත්වය සහ වෛරසය සම්ප්‍රේෂණය කළ හැකිද යන්න ඔප්පු කළ නොහැක.ධනාත්මක න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණයක් ඇති රෝගියෙකු නැවතත් ආසාදන මූලාශ්රයක් බවට පත් වන්නේද යන්න ඔප්පු කිරීම අවශ්ය වේ.සායනික සාම්පල මත වෛරස් සංස්කෘතිය සිදු කිරීම සහ එය බෝවන බව ඔප්පු කිරීම සඳහා "සජීවී" වෛරසයක් වගා කිරීම අවශ්ය වේ.
සාරාංශය
සාරාංශයක් ලෙස, SARS-CoV-2 නියුක්ලෙයික් අම්ලය සාවද්‍ය ඍණාත්මක පරීක්ෂණ, ධනාත්මක නැවත පරීක්ෂා කිරීම සහ සායනික ප්‍රකාශනයන්ට නොගැලපෙන වෙනත් තත්වයන් සම්පූර්ණයෙන්ම වළක්වා ගත නොහැක.සත්‍ය පරීක්‍ෂාවේදී සහ පරීක්ෂා කිරීමේදී, මග හැරුණු රෝග විනිශ්චය සහ වැරදි රෝග විනිශ්චය වැළැක්වීම සඳහා පුළුල් රෝග විනිශ්චය සඳහා සායනික රෝග ලක්ෂණ, රූප පරීක්ෂණ (CT) සහ පරීක්ෂණ රසායනාගාර පරීක්ෂණය (න්යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂණය + වෛරස් විශේෂිත ප්‍රතිදේහ පරීක්ෂණය) ප්රතිඵල ඒකාබද්ධ කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.පරීක්ෂණ ප්රතිඵල පැහැදිලිවම සායනික ප්‍රකාශනයන් සමඟ නොගැලපෙන බව අනාවරණය වුවහොත්, SARS-CoV-2 වෛරසය මුල් ආසාදනය, පුනරාවර්තන ආසාදනය හෝ වෙනත් ශ්වසන වෛරස් ආසාදන ආදියෙන් බැහැර කිරීම සඳහා සම්පූර්ණ පරීක්ෂණ සබැඳිය (නියැදි එකතු කිරීම, සංසරණය සහ සැකසුම් සබැඳි) පිළිබඳ පුළුල් විශ්ලේෂණයක් සිදු කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.කොන්දේසි අනුමත කරන්නේ නම්, නැවත පරීක්ෂා කිරීම සඳහා sputum හෝ alveolar lavage තරල වැනි වඩාත් සංවේදී සාම්පල එකතු කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.
ආශ්රිත නිෂ්පාදන:
SARS-CoV-2 Nucleic Acid Detection Kit (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method)
පසු කාලය: සැප්-03-2021
