විය හැකි ගැටළු පිළිබඳ පහත විශ්ලේෂණයබුකල්ස්පුබ්/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.
පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව අවහිර වී ඇත
මෙම කට්ටලය තුළ, ප්‍රවේණික DNA නිස්සාරණය කිරීමේ මෙහෙයුමේදී, කේන්ද්රාපසාරී පියවරකින් තොරව නියැදි එන්සයිම ලිසිස් මිශ්‍රණය මත පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සෘජුවම අවශෝෂණය කර ඇති අතර, නියැදියේ අසම්පූර්ණ එන්සයිමීකරණය සහ ඉහළ දුස්ස්රාවීතාවය හේතුවෙන් පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව අවහිර විය හැක.
පහත සඳහන් විය හැකි හේතු පහත පරිදි වේ:
1. පටක සාම්පල අසම්පූර්ණ එන්සයිම ජීර්ණය.
නිර්දේශය: Foregene Protease හි නියැදි සැකසුම් කාලය සුදුසු පරිදි දීර්ඝ කළ හැක හෝ 12,000 rpm (~ 13,400) දී කේන්ද්රාපසාරී කිරීමෙන් පසු අධි ප්‍රවාහය ගත හැක.× g) විනාඩි 5 ක් සඳහා.
2. පටක සාම්පල හෝ විශාල පටක අධික ලෙස භාවිතා කිරීම.
නිර්දේශය: 1 නොඉක්මවීම වඩාත් සුදුසුයබුකල් සාම්පලයේ ස්පුබ්;නියැදිය ඉතා විශාල නම්, ඒ අනුව බෆර් ST1, Foregene Protease, buffer ST2 මාත්‍රාව වැඩි කරන්න.
3. නියැදි දුස්ස්රාවීතාව ඉතා ඉහළ ය.
නිර්දේශය: සාම්පල ප්‍රවේණික DNA නිස්සාරණයට පෙර Tris-HCl 10 mM සමඟ නිසි ලෙස තනුක කළ හැක.
4. රුධිර කාඩ්පතේ කොටස් උරාබී ඇත.
නිර්දේශය: රුධිර ලප (FTA කාඩ්) ජානමය නිස්සාරණයේ 6 වන පියවරේ තාවකාලික කේන්ද්රාපසාරී කාලය නිසි ලෙස දීර්ඝ කළ හැක.
අඩු අස්වැන්නක් හෝ DNA නැත
නියැදි සම්භවය, නියැදි ගබඩා තත්ත්වයන්, නියැදි සකස් කිරීම, හැසිරවීම යනාදිය ඇතුළුව ජානමය DNA අස්වැන්න කෙරෙහි බලපාන විවිධ සාධක බොහෝ විට ඇත.
නිස්සාරණය කිරීමේදී ජානමය DNA ලබා ගත නොහැක
විය හැකි හේතු පහත පරිදි වේ:
1. සාම්පල අනිසි ලෙස සංරක්ෂණය කිරීම හෝ දිගු කාලයක් ගබඩා කිරීම ප්‍රවේණික DNA ක්ෂය වීමට හේතු වේ.
නිර්දේශය: මුඛ ස්පුබ් නැවුම්ව සාම්පල ලබා ගත යුතු අතර, ජානමය DNA නිස්සාරණය කිරීමේ මෙහෙයුම් සඳහා සංරක්ෂණය කරන ලද ස්පුබ් භාවිතා කිරීම සුදුසු නොවේ;රුධිර පැල්ලම් සාම්පල ගුණාත්මක බව සහතික කළ යුතු අතර ගබඩා කාලය දිගු නොවිය යුතුය.
2. ඉතා කුඩා පටක භාවිතය අනුරූප ජානමය DNA නිස්සාරණය නොකිරීමට හේතු විය හැක.
නිර්දේශය: අනුගමනය කරන්නබුකාl මෙහෙයුම් මාර්ගෝපදේශයෙහි swab නියැදීම් උපදෙස්, සහ ප්‍රවේණි DNA නිස්සාරණය සඳහා ප්‍රමාණවත් සෛල මුඛ ස්පුබ් එකට සම්බන්ධ කළ හැකි වන පරිදි හැකි තරම් වාර ගණනක් පිස දමන්න;රුධිර පැල්ලම් සාම්පල නිස්සාරණය සඳහා, රුධිර පැල්ලම් කැපීමේ ප්රදේශය නිසි ලෙස වැඩි කළ හැක.
3. Foregene Protease නුසුදුසු ලෙස සංරක්ෂණය කර ඇති අතර, එහි ක්රියාකාරිත්වය හෝ අක්රිය වීම අඩු වේ.
නිර්දේශය: ගබඩා කොන්දේසි තහවුරු කරන්නඑෆ්oregene Protease හෝ එන්සයිම ප්රතික්රියාව සඳහා නව Foregene Protease එකක් සමඟ එය ප්රතිස්ථාපනය කරන්න.
4. කට්ටලයේ අනිසි ලෙස සංරක්ෂණය කිරීම හෝ ගබඩා කිරීමේ කාලය ඉතා දිගු වන අතර, එහි ප්රතිඵලයක් වශයෙන් කට්ටලයේ සමහර සංරචක අසාර්ථක වේ.
නිර්දේශය: අලුත් එකක් මිලදී ගන්නබුකල් swab DNAඒකලනය අදාළ ක්රියා පටිපාටි සඳහා කට්ටලය.
5. බෆර් WB නිරපේක්ෂ එතනෝල් එකතු නොකරයි.
නිර්දේශය: බෆරය WB නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කරන බව තහවුරු කරන්න.
6. සිලිකොන් පටලයට එලියුන්ට් නිවැරදිව එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: 65 එකතු කරන්න°Cපෙර-උණුසුම් කරන ලද එලියුන්ට් සිලිකොන් පටලය මැදට බැස කාමර උෂ්ණත්වයේ විනාඩි 5 ක් තබන්න.
LOW-අයිල්ඩ් ජානමය DNA හුදකලා
පහත සඳහන් විය හැකි හේතු පහත පරිදි වේ:
1. සාම්පල අනිසි ලෙස සංරක්ෂණය කිරීම හෝ දිගු කාලයක් ගබඩා කිරීම ප්‍රවේණික DNA ක්ෂය වීමට හේතු වේ.
නිර්දේශය: මුඛ ස්පුබ් නැවුම් ලෙස සාම්පල ලබා ගැනීම වඩාත් සුදුසු වන අතර ජානමය DNA නිස්සාරණය සඳහා සංරක්ෂණය කර ඇති ස්පුබ් භාවිතා නොකළ යුතුය.
2. පටක සාම්පල ප්‍රමාණය ඉතා කුඩා නම්, නිස්සාරණය කරන ලද ජානමය DNA අන්තර්ගතය අඩු වේ.
නිර්දේශය: ප්‍රවේණික DNA නිස්සාරණය සඳහා ප්‍රමාණවත් සෛල මුඛ ස්පුබ් එකට සම්බන්ධ කළ හැකි වන පරිදි හැකි තරම් වාර ගණනක් පිසදමමින්, මෙහෙයුම් මාර්ගෝපදේශයේ ඇති මුඛ ස්පුබ් නියැදීමේ උපදෙස් අනුගමනය කරන්න.
3. Foregene Protease නුසුදුසු ලෙස සංරක්ෂණය කර ඇති අතර, එහි ක්රියාකාරිත්වය හෝ අක්රිය වීම අඩු වේ.
නිර්දේශය: ගබඩා කොන්දේසි තහවුරු කරන්නthe Foregene Protease හෝ එය නව එකක් සමඟ ප්රතිස්ථාපනය කරන්න එන්සයිම ප්රතික්රියාව සඳහා Foregene Protease.
4. එලියුන්ට් ගැටළු.
නිර්දේශය: elution සඳහා Buffer EB භාවිතා කරන්න;ddH භාවිතා කරන්නේ නම්2O හෝ වෙනත් eluents, eluate හි pH අගය 7.0-8.5 අතර බව තහවුරු කරන්න.
5. eluate නිවැරදිව dropwise එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: සිලිකොන් පටලයේ මැදට එලියුන්ට් බිංදු එකතු කර කාමර උෂ්ණත්වයේ විනාඩි 5 ක් තබන්න.
6. එලියුෂන් දියර ඉතා සුළු වශයෙන් එකතු වේ.
නිර්දේශය: අවම වශයෙන් උපදෙස්වල අවශ්‍ය පරිදි ප්‍රවේණික DNA ඉවත් කිරීම සඳහා eluent භාවිතා කරන්නඅඩු නොවේ 15 ට වඩාμl.
Low purity of ජානමය DNAහුදකලා
අඩු ප්‍රවේණික DNA සංශුද්ධතාවය අසාර්ථක වීමට හෝ පහළ මට්ටමේ පර්යේෂණවල අසතුටුදායක ප්‍රතිඵලවලට හේතු විය හැක, එනම්: එන්සයිම විවෘත කළ නොහැක, PCR හට උනන්දුව දක්වන ජාන කැබැල්ල ලබා ගත නොහැක, යනාදිය.
විය හැකි හේතු පහත පරිදි වේ:
1. Heteroprotein දූෂණය, RNA දූෂණය.
විශ්ලේෂණය: පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව බෆර් PW භාවිතයෙන් සෝදා නැත;බෆර් PW වොෂ් පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව නිවැරදි කේන්ද්රාපසාරී වේගය භාවිතයෙන් සෝදා නැත.
නිර්දේශය: එතනෝල් එකතු කිරීමට පෙර අධි ප්‍රවාහයේ වර්ෂාපතනයක් නොමැති බව සහතික කර ගන්න;උපදෙස් අනුව පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සේදීමට වග බලා ගන්න, මෙම පියවර මඟ හැරිය නොහැක.
2. අපිරිසිදු අයන දූෂණය.
විශ්ලේෂණය: බෆර් WB වොෂ් පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව ඉවත් කර හෝ එක් වරක් පමණක් සෝදා ඉවත් කර ඇති අතර, එහි ප්රතිඵලයක් ලෙස අවශේෂ අයනික අපවිත්‍ර වීම සිදු විය.
නිර්දේශය: හැකිතාක් දුරට අවශේෂ අයන ඉවත් කිරීම සඳහා බෆර් WB 2 වතාවක් සේදීමට වග බලා ගන්න.
3. RNA එන්සයිම දූෂණය.
විශ්ලේෂණය: විදේශීය RNases බෆරයට එකතු කරන ලදී;බෆර PW සේදීමේ ක්රියාකාරිත්වය වැරදි වූ අතර, එහි ප්රතිඵලයක් ලෙස RNase අවශේෂ, in vitro transcription වැනි පහළ RNA පර්යේෂණාත්මක මෙහෙයුම් වලට බලපායි.
නිර්දේශය: Foregene ශ්‍රේණි න්‍යෂ්ටික අම්ලයisolaRNase අතිරේක එකතු කිරීමකින් තොරව tion කට්ටල මගින් RNA ඉවත් කළ හැක,මෙලෙස buccal Swab/FTA කාඩ්පත DNA හුදකලා කට්ටලයඅවශ්යයි't RNase එකතු කරන්න;Buffer PW සෝදා පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සඳහා උපදෙස් අනුගමනය කිරීමට වග බලා ගන්න, මෙම පියවර මඟ හැරිය නොහැක.
4. එතනෝල් අවශේෂ.
විශ්ලේෂණය: Buffer WB පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සේදීමෙන් පසු හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු නොකළේය.
නිර්දේශය: උපදෙස් අනුව නිවැරදි හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී මෙහෙයුම සිදු කරන්න.
5. වෙනත් අපිරිසිදු දූෂණය.
විශ්ලේෂණය: සුරකින ලද සාම්පල හෝ විශේෂ සාම්පල පූර්ව ප්‍රතිකාර නොකෙරේ.
නිර්දේශය: උපදෙස් දී ඇති පරිදි නියැදිය තරයේ පෙරට ගන්න.
පසු කාලය: මාර්තු-18-2022
