රසායනාගාර පරීක්ෂණ ආරම්භ වන්නේ නියැදි එකතු කිරීමෙනි, නියැදි එකතු කිරීම නොසලකා හැරීමට පහසුම වේ.නියැදි එකතු කිරීම සඳහා වඩාත්ම වැදගත් දෙය වන්නේ නිවැරදි නියැදි වර්ගය තෝරා ගැනීම, සුදුසු නියැදි මෙවලම් භාවිතා කිරීම සහ සාධාරණ ප්‍රවාහනය සහ සැකසීම සිදු කිරීමයි.

I. නියැදි වර්ගය

පොදු සාම්පල වර්ග පහත පරිදි වේ:

නියැදීමේ ක්‍රමයට කෘෂිකාර්මික වෙළඳ (බසාර්) වෙළඳපොලේ නව කොරෝනා වයිරසයේ පාරිසරික අධීක්ෂණය සඳහා වන තාක්ෂණික පිරිවිතරයන් වෙත යොමු විය හැකිය.

1. උගුර තුවාල, අත්, ඇඳුම් සහ වෘත්තිකයින්ගේ අනෙකුත් වස්තූන්ගෙන් නියැදි සාම්පල: වෛරස් නියැදි නලයේ වෛරස් සංරක්ෂණ ද්‍රාවණය භාවිතා කිරීම සහ නියැදීම් කපු පුළුන් වලට සම්පූර්ණයෙන්ම ඇතුල් කිරීම අවශ්‍ය වේ.බිම මතුපිට) නැවත නැවතත් යොදන අතර 3 වතාවකට වඩා සේදීම.ඒ අතරම, නියැදි වස්තුවේ මතුපිට බහු-ලක්ෂ්ය බෙදා හරින ලද නියැදීම සිදු කිරීම අවශ්ය වේ.

2. ආහාර මතුපිට ස්පුබ් සාම්පල: ආහාර සාම්පල සෘජුවම එකතු කළ නොහැක.ස්පුබ් සාම්පල එකතු කිරීමට පෙර එකතු කළ යුතු ආහාර ප්‍රවේශමෙන් වෙන් කර පිරිසිදු සාම්පල බෑගයක ගබඩා කළ යුතුය.නියැදි කපු පුළුන් පුළුන් පුළුන් පුළුන් පුළුන් පුළුන් පොඟවා ගැනීමෙන් පසුව, නැවත නැවත ආලේප කර 3 වතාවකට වඩා එකතු කළ යුතු ආහාර නියැදියේ මතුපිට සෝදා හරින්න, වෛරස් නියැදි නළයේ වෛරස් සංරක්ෂණ ද්‍රාවණය භාවිතා කිරීම අවශ්‍ය වේ.ඒ සමගම, නියැදි පෘෂ්ඨය මත බහු-ලක්ෂ්ය බෙදා හරින ලද නියැදීම සිදු කිරීම අවශ්ය වේ.

3. අපද්‍රව්‍ය සාම්පල: වෙළඳපොලේ ඇති ජලාපවහන පද්ධතියේ ව්‍යාප්තිය අනුව, අභ්‍යන්තර නල ජාල එකතුව, ජල ප්‍රවාහයේ පහළට හෝ නාගරික නල ජාලය සමඟ සම්බන්ධ වීම කෙරෙහි අවධානය යොමු කරමින්, අපජල නියැදි ස්ථාන 2-3 ක් තෝරන්න.ස්පුබ් නියැදියක් එකතු කිරීම සඳහා, අපද්‍රව්‍ය අවශෝෂණය කර ගැනීම සඳහා නියැදි කපු පුළුන් කැබැල්ලකින් එය අපජලයේ ගිල්වා නියැදි නළයේ 3 වතාවකට වඩා මෙයට පිළියමක් යොදන්න.අපද්රව්ය සාම්පල එකතු කිරීම සඳහා, 30-500 mL අපද්රව්ය ජල සාම්පල එකතු කිරීම සඳහා පොලිඑතිලීන් ප්ලාස්ටික් බෝතල් භාවිතා කරන්න;500 mL ට වැඩි පරිමාවක් සහිත අපද්රව්ය එකතු කිරීම සඳහා, පොලිඑතිලීන් ප්ලාස්ටික් බාල්දි හෝ ස්ථානීය ජල සාම්පල විශේෂ සාරවත් කිරීමේ උපකරණ භාවිතා කළ හැකිය.ඒ සමගම, අපද්රව්ය නියැදි ස්ථානය සඳහා බහු-ලක්ෂ්ය බෙදා හරින ලද නියැදීමක් පැවැත්වීම අවශ්ය වේ.

4. සත්ව සාම්පල: සජීවී සතුන් සඳහා, ශරීර මතුපිට ස්පුබ්, ඕරොෆරින්ජියල් ස්පුබ් සහ ගුද ස්පුබ් එකතු කිරීමට නියැදි ස්පුබ් භාවිතා කළ හැකි අතර, අසූචි හෝ ස්‍රාවය කරන සාම්පල ද එකතු කර වාර්තා පත්‍රයේ සටහන් කළ හැකිය.සම ඉවත් කිරීම ආදියට ලක් වූ සත්ව සාම්පල සඳහා, ඔවුන්ගේ ශරීර මතුපිට සහ ශරීර කුහරයේ ස්පුබ් සාම්පල එකතු කිරීම සඳහා කපු පුළුන් භාවිතා කරන්න.නියැදීම් කපු පුළුන් කැබැල්ලට සම්පූර්ණයෙන්ම ඇතුල් වීමට වෛරස් නියැදි නලයේ වෛරස් සංරක්ෂණ ද්‍රාවණය භාවිතා කිරීම අවශ්‍ය වන අතර පසුව එකතු කළ යුතු ආහාර නියැදියේ මතුපිට නැවත යෙදීම අවශ්‍ය වේ.ෂාබු 3 වතාවකට වඩා.ඒ සමගම, නියැදි පෘෂ්ඨය මත බහු-ලක්ෂ්ය බෙදා හරින ලද නියැදීම සිදු කිරීම අවශ්ය වේ.

5. වෙනත් උපකරණ: කූඩු හෝ මාළු ටැංකි වැනි සතුන් ප්‍රවාහනය සහ බෝ කිරීම සඳහා බහාලුම්.පළමුව, කන්ටේනරය තුළ ගබඩා කර ඇති සහ අභිජනනය කරන ලද විශේෂිත සතුන් නිරීක්ෂණය කිරීම හෝ අවබෝධ කර ගැනීම සහ බහාලුම්වල අභ්යන්තර බිත්තිය මත ස්පුබ් සාම්පල හෝ අන්තර්ගතයේ දියර සාම්පල එකතු කිරීම.

6. මිනිසුන් එක්රැස් වන ප්‍රදේශ, දුර්වල වාතාශ්‍රය සහිත ප්‍රාදේශීය වෙළඳ ප්‍රදේශ, කාර්යාල සහ විවේක කාමරවල aerosol සාම්පල එකතු කරන්න.

II.නියැදි මෙවලම්
1. රුධිර එකතු කිරීමේ නළය
ඔබට පසුව න්‍යෂ්ටික අම්ල පරීක්ෂාව සහ ප්‍රතිදේහජනක සාම්පල සිදු කිරීමට අවශ්‍ය නම්, රුධිරය එකතු කිරීම සඳහා EDTA ප්‍රතිදේහජනක අඩංගු රික්ත රුධිර නාලයක් භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ;සෙරුමය සාම්පල සඳහා, ප්‍රතිදේහජනක නොමැතිව රික්ත රුධිර නාලයක් භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.

2. සාම්පල ස්පුබ්

කැල්සියම් ඇල්ජිනේට් ස්පුබ් හෝ ලී කණු සහිත ස්පුබ් වෙනුවට පොලිප්‍රොපිලීන් ස්පුබ් භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ, මන්ද ඒවායේ ඇතැම් වෛරස් අක්‍රිය කරන සහ PCR පරීක්ෂාව වළක්වන ද්‍රව්‍ය අඩංගු විය හැකි බැවිනි.කපු තන්තු වල ප්‍රෝටීන් වල ප්‍රබල අවශෝෂණයක් ඇති නිසා සහ පසුකාලීන සංරක්ෂණ ද්‍රාවණයට පහසුවෙන් ඉවත් කළ නොහැකි නිසා, කපු හිස් සහිත ස්පුබ් භාවිතා කළ නොහැක.

“නව කොරෝනා වයිරස් න්‍යෂ්ටික අම්ල 10-in-1 මිශ්‍ර එකතු කිරීම සහ හඳුනා ගැනීම සඳහා වන තාක්ෂණික පිරිවිතර” තුළ, “නියැදි ස්පුබ් එක පොලියෙස්ටර්, නයිලෝන් සහ වෙනත් කපු නොවන සහ කැල්සියම් ඇල්ජිනේට් ද්‍රව්‍ය වලින් සෑදිය යුතු අතර, හසුරුව ලී නොවන ද්‍රව්‍යවලින් සෑදිය යුතු බව පැහැදිලිවම නියම කර ඇත.බිඳෙන ස්ථානය ස්පුබ් හිස මුදුනේ සිට සෙන්ටිමීටර 3 ක් පමණ වන අතර එය කැඩීමට පහසුය.

එක්සත් ජනපදයේ CDC ද සඳහන් කළේ “ප්ලාස්ටික් හෝ කම්බි පතුවළ සහිත කෘතිම තන්තු ස්පුබ් පමණක් භාවිතා කරන්න.ලී පතුවළ සහිත කැල්සියම් ඇල්ජිනේට් ස්පුබ් හෝ ස්පුබ් භාවිතා නොකරන්න,සමහර වෛරස් අක්‍රිය කරන සහ PCR පරීක්ෂාව වළක්වන ද්‍රව්‍ය ඒවායේ අඩංගු විය හැකි බැවිනි.

දැනට බහුලව භාවිතා වන්නේ ප්ලාස්ටික් දණ්ඩක් සමඟ ඒකාබද්ධ කළ ඉවත දැමිය හැකි වඳ නයිලෝන් රැළ සහිත ස්පුබ් ය.Flocking swab වඩා හොඳ ජල අවශෝෂණය සහ මුදා හැරීමේ අනුපාතය ඇත.විවිධ නියැදීම් අඩවි වලට අනුව, ස්පුබ් හිසෙහි විවිධ ප්රමාණ සහ කෙඳි ද ඇත.ඝනකම.”

3. නියැදි ප්‍රවාහන සංරක්ෂණ විසඳුම

වෛරස් අක්‍රිය කිරීමේ සංරක්ෂණ ද්‍රාවණය: සුදුසු ග්වානඩින් ලවණ සාන්ද්‍රණයක් සහ විවිධ වෛරස් ලයිසිස් සංරචක මගින් න්‍යෂ්ටික අම්ලය මුදා හැරීමට, RNase සහ DNase අක්‍රිය කිරීමට, සහ පසුව qPCR හඳුනාගැනීම සඳහා භාවිතා කළ හැකි න්‍යෂ්ටික අම්ලයේ අඛණ්ඩතාව සහතික කිරීමට වෛරසය සෘජුවම ලිස් කළ හැකිය.එය වෛරස් වගාව සහ හුදකලා කිරීම සඳහා භාවිතා කළ නොහැක.

වෛරස් ප්රවාහනය සහ සංරක්ෂණ විසඳුම: වෛරසයේ ක්රියාකාරිත්වය පවත්වා ගත හැකි ලවණ, ඇමයිනෝ අම්ල, විටමින්, ග්ලූකෝස් සහ වෛරසයේ පැවැත්ම සඳහා අවශ්ය ප්රෝටීන් අඩංගු වේ.එය අනාගතයේ දී න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සහ වෛරසය හඳුනා ගැනීම සඳහා භාවිතා කළ හැකි අතර, එය වෛරසය වගා කිරීම සහ වෙන් කිරීම සඳහා ද භාවිතා කළ හැකිය.

4. නියැදි සංරක්ෂණ නළය සහ සාම්පල බෑගය

නියැදි ගබඩා නළය නියුක්ලෙයික් අම්ලය අවශෝෂණය නොකරන ඉස්කුරුප්පු පියනක් සහිත වඳ ප්ලාස්ටික් නලයක් විය යුතුය.සෑම නියැදි නලයක්ම නියැදියේ කාන්දු වීම සහ අපවිත්‍ර වීම වැළැක්වීම සඳහා සාම්පල බෑගයකින් ආවරණය කළ යුතුය.

III.සාම්පලයට බාධා කරන ද්රව්ය

PCR අත්හදා බැලීම් වලට බාධා කරන ද්‍රව්‍ය

1. අන්තරාසර්ග මැදිහත්වීම්

ශරීරයේ සාම්පලයේ ඇති ද්‍රව්‍ය වෙනත් ද්‍රව්‍ය හඳුනා ගැනීමට බාධා කළ හැකිය.

ලේ:heme (>1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ, IgG, ආදිය.

මුත්රා:යූරියා (20mM);

පුටුව:ශාක පොලිසැකරයිඩ, චෝලට්;

පටක:ප්රෝටේස්, කොලජන්;

කිරි: ප්රෝටේස්, කැල්සියම් අයන;

ඖෂධ: ප්රතිජීවක, ප්රතිවෛරස් ඖෂධ, හෝමෝන, ආදිය.

අනික්.

2. exogenous interferent

එය පැමිණෙන්නේ vitro හි අනෙකුත් ද්‍රව්‍ය හඳුනා ගැනීමට බාධා කළ හැකි ද්‍රව්‍ය මගිනි.නියැදි එකතු කිරීම සහ සැකසීමේදී සම්බන්ධ කර ගත හැකි නියැදි ආකලන සහ ද්‍රව්‍ය:

පරීක්ෂණ සැපයුම්: සෙරුමය වෙන් කිරීමේ ජෙල්, නියැදි එකතු කිරීමේ බහාලුම් සහ රබර් නැවතුම, කැතීටර්, කැතීටර් ෆ්ලෂ් කිරීමේ තරලය, අත්වැසුම් කුඩු, ආදිය.

ප්රතිංධිසරාේධක: heparin (> 0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), ආදිය;

කාබනික ද්‍රාවක: isopropanol (>0.1 IU/ml), betaine, dimethyl sulfoxide, formamide, glycerin, PEG, etc.;

විෂබීජ නාශක: ඇල්කොහොල් (එතනෝල්>1%), ඇල්ඩිහයිඩ්, ෆීනෝල් ​​(ෆීනෝල්>0.2%), පෙරොක්සයිඩ්, ශක්තිමත් අම්ල (HCL), ශක්තිමත් ක්ෂාර (NaOH) ආදිය.

ඩිටර්ජන්ට්:SDS (> 0.005%);

පාංශු: හියුමස්

ඩයිස්ට්ෆ්: ඉන්ඩිගෝ

අනික්.

පාරිසරික සාම්පල එකතු කිරීම වැනි සත්‍ය එළිමහන් නියැදි තත්ව යටතේ, සාම්පලවල විවිධ බාධාකාරී ද්‍රව්‍ය අඩංගු විය හැකි අතර, එක් එක් ස්ථානයේ ඇති බාධාකාරී ද්‍රව්‍යවල සංයුතිය වෙනස් වේ, ඒ සඳහා දේශීය තත්වයන් අනුව PCR මැදිහත්වීම් අත්හදා බැලීම් සිදු කිරීම අවශ්‍ය වේ.

IV.නියැදි ගබඩා සහ ප්‍රවාහන කොන්දේසි

අලුතින් එකතු කරන ලද සායනික නිදර්ශක 2 ° C සිට 8 ° C දක්වා එකතු කිරීමෙන් පසු පැය 2 සිට 4 දක්වා කාලය තුළ රසායනාගාරයට යැවිය යුතුය.පැය 24ක් ඇතුළත 4℃ උෂ්ණත්වයේ ගබඩා කරන්න.වෛරස් හුදකලා කිරීම සහ න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීම සඳහා භාවිතා කරන නිදර්ශක හැකි ඉක්මනින් පරීක්ෂා කළ යුතුය.පැය 24 ක් ඇතුළත පරීක්ෂා කළ හැකි නිදර්ශක 4 ° C දී ගබඩා කළ හැක;පැය 24ක් ඇතුළත හඳුනාගත නොහැකි නිදර්ශක -70°C හෝ ඊට පහළින් ගබඩා කළ යුතුය (එසේ නොවේ නම්- 70°C උෂ්ණත්වයේ ශීතකරණයක -20°C දී ගබඩා කරන්න).

සාරාංශය:සාම්පල ප්‍රමිතිගත එකතු කිරීම, ප්‍රවාහනය සහ ගබඩා කිරීම පසුකාලීන පරීක්ෂණ සඳහා අත්‍යවශ්‍ය වේ.බොහෝ රසායනාගාර පරීක්ෂණවල සාවද්‍ය නිෂේධනයන් වෛරස් න්‍යෂ්ටික අම්ලය පිරිහීමට තුඩු දෙන සාම්පල නුසුදුසු එකතු කිරීම, ප්‍රවාහනය සහ ගබඩා කිරීම හේතු වේ.කෙසේ වෙතත්, බොහෝ රසායනාගාර තවමත් නියැදීමේ වැදගත්කම නොසලකා හරියි.මෙම ලිපියෙන් නියැදීම කෙරෙහි සෑම දෙනාගේම අවධානය අවදි කර වඩාත් විද්‍යාත්මක හා සාධාරණ නියැදීමක් කළ හැකි යැයි මම බලාපොරොත්තු වෙමි!

අදාළ නිෂ්පාදනය:

SARS-CoV-2 ප්‍රභේද න්‍යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ කට්ටලය (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method)-බ්‍රසීලය, දකුණු අප්‍රිකාව සහ එක්සත් රාජධානියේ සිට විකෘති හඳුනාගැනීම සඳහා