ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය පොලිසැකරයිඩ සහ පොලිෆෙනෝල් අඩු ශාක සඳහා සම්පූර්ණ RNA Purificaiton කට්ටලය
පිරිවිතර
සූදානම් කිරීම් 50 ක්, සූදානම් කිරීම් 200 ක්
කට්ටලය Foregene විසින් නිපදවන ලද භ්‍රමණය තීරුව සහ සූත්‍රය භාවිතා කරයි, එමඟින් අඩු පොලිසැකරයිඩ සහ පොලිෆෙනෝල් අන්තර්ගතය සහිත විවිධ ශාක පටක වලින් ඉහළ සංශුද්ධතාවය සහ උසස් තත්ත්වයේ සම්පූර්ණ RNA කාර්යක්ෂමව නිස්සාරණය කළ හැකිය.ඉහළ පොලිසැකරයිඩ හෝ පොලිෆෙනෝල් අන්තර්ගතය සහිත ශාක සාම්පල සඳහා, වඩා හොඳ RNA නිස්සාරණ ප්‍රතිඵල ලබා ගැනීම සඳහා ශාක සම්පූර්ණ RNA Isolation Plus Kit භාවිතා කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.මෙම කට්ටලය DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සපයන අතර එමඟින් අධිප්‍රවාහක සහ පටක ලයිසේට් වෙතින් ජානමය DNA පහසුවෙන් ඉවත් කළ හැකිය.RNA-පමණක් තීරුවට RNA ඵලදායී ලෙස බැඳිය හැක.කට්ටලයට එකවර සාම්පල විශාල ප්‍රමාණයක් සැකසිය හැක.
සම්පූර්ණ පද්ධතියම RNase අඩංගු නොවේ, එබැවින් පිරිසිදු RNA පිරිහීමට ලක් නොවේ.Buffer PRW1 සහ Buffer PRW2 මගින් ලබාගත් RNA ප්‍රෝටීන්, DNA, අයන සහ කාබනික සංයෝග මගින් දූෂිත නොවන බව සහතික කළ හැක.
කට්ටල සංරචක
| Buffer PSL1, Buffer PS, Buffer PSL2 |
| Buffer PRW1, Buffer PRW2 |
| RNase-Free ddH2O, DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව |
| RNA-පමණක් තීරුව |
| උපදෙස් |
විශේෂාංග සහ වාසි
■ අයිස් නාන සහ අඩු උෂ්ණත්ව කේන්ද්‍රාපසාරණයකින් තොරව මුළු ක්‍රියාවලිය පුරාම කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25℃) ක්රියාත්මක වීම.
■ සම්පූර්ණ කට්ටලය RNase-නිදහස්, RNA ක්ෂය වීම ගැන කරදර විය යුතු නැත.
■ DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව විශේෂයෙන් DNA සමඟ බන්ධනය වන අතර එමඟින් කට්ටලයට DNase එකතු නොකර ජානමය DNA දූෂණය ඉවත් කළ හැකිය.
■ ඉහළ RNA අස්වැන්න: RNA-පමණක් තීරුව සහ අද්විතීය සූත්‍රයට RNA කාර්යක්ෂමව පිරිසිදු කළ හැක.
■ වේගවත් වේගය: ක්රියාත්මක කිරීමට පහසු සහ විනාඩි 30 ක් ඇතුළත සම්පූර්ණ කළ හැක.
■ ආරක්ෂාව: කාබනික ප්රතික්රියාකාරක අවශ්ය නොවේ.
■ උසස් තත්ත්වයේ: පිරිසිදු කරන ලද RNA කොටස් ඉහළ සංශුද්ධතාවයකින් යුක්ත වන අතර ප්‍රෝටීන් සහ අනෙකුත් අපද්‍රව්‍ය වලින් තොර වන අතර විවිධ පහළට පර්යේෂණාත්මක යෙදුම් සපුරාලිය හැක.
කට්ටල යෙදුම
අඩු පොලිසැකරයිඩ සහ පොලිෆෙනෝල් අන්තර්ගතයක් සහිත නැවුම් හෝ ශීත කළ ශාක පටක සාම්පල (විශේෂයෙන් නැවුම් ශාක පත්‍ර පටක) වලින් සම්පූර්ණ ආර්එන්ඒ නිස්සාරණය සහ පිරිසිදු කිරීම සඳහා එය සුදුසු වේ.
වැඩ ප්රවාහය
රූප සටහන
ශාක සම්පූර්ණ RNA Isolation Kit Plus මගින් පොලිසැකරයිඩ සහ පොලිෆෙනෝල්වල නැවුම් කොළ 50mg සකසන ලද අතර 5% පිරිසිදු RNA ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් මගින් පරීක්ෂා කරන ලදී.
1: කෙසෙල්
2: ජින්ගෝ
3: කපු
4: දෙළුම්
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීමේ කාලය
කට්ටලය වියළි පරිසරයක කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ℃) මාස 12 ක් සහ දිගු කාලයක් (මාස 24) 2-8 ℃ ගබඩා කළ හැක.
Buffer PSL1 2-hydroxy-1-ethanethiol (විකල්ප) එකතු කිරීමෙන් පසු මාස 1 ක් සඳහා 4 ℃ ගබඩා කළ හැක.
ගැටළු විශ්ලේෂණ මාර්ගෝපදේශය
ඔබට මුහුණ දිය හැකි ගැටළු පිළිබඳ පහත විශ්ලේෂණයශාක එකතුවRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
කැරකෙන තීරුව අවහිර වී ඇත
භ්‍රමණ තීරුව අවහිර වීම නිසා RNA අස්වැන්න අඩු වීමට හෝ RNA ලබා ගැනීමට පිරිසිදු කිරීමට පවා නොහැකි වන අතර, ලබාගත් RNA වල ගුණාත්මක භාවය අඩු වේ.
පොදු හේතු විශ්ලේෂණය:
1. නියැදිය සම්පූර්ණයෙන්ම කැඩී නැත.
අසම්පූර්ණ නියැදි ඛණ්ඩනය DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව අවහිර කළ හැකි අතර, එය RNA අස්වැන්න හා ගුණාත්මක භාවයට ද බලපෑ හැකිය.නියැදි ඛණ්ඩනය සිදු කරන විට, හැකිතාක් සාම්පලවල සෛල බිත්ති සහ සෛල පටල වැනි පටක කැඩීම සඳහා ප්‍රමාණවත් ද්‍රව නයිට්‍රජන් ප්‍රමාණයකින් ඉක්මනින් ඇඹරීමට අපි නිර්දේශ කරමු.පොලිෆෙනෝල් පොලිසැකරයිඩවල ශාක සාම්පල සඳහා, ඔබ ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු.
2.ඩීඑන්ඒ-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව හුදකලා වූ අධි ප්‍රකට ද්‍රව්‍ය ඇස්පිරේට් කරන්න, විය හැකි සෛල සුන්බුන් පෙති උරාගන්න.
ආර්එන්ඒ අවශෝෂණ ක්‍රියා පටිපාටිවලදී උද්දීපනය කරන ලද සෛල සුන්බුන් පෙති වලට ආර්එන්ඒ පමණක් තීරුව අවහිර කළ හැකිය (ක්‍රියා පටිපාටියේ 5 වන පියවර, පොලිසැකරයිඩ පොලිෆෙනෝල් ක්‍රියා පටිපාටියේ 6 වන පියවර බලන්න).සෛල අපද්‍රව්‍ය උද්දීපනය වීම වළක්වා ගැනීම සඳහා මෙම අධි ප්රවාහය උද්දීපනය කිරීමේදී සැලකිලිමත් විය යුතු බව අපි නිර්දේශ කරමු.
3. සාම්පලයේ ආරම්භක ප්‍රමාණය ඉතා විශාලය.
අධික නියැදි භාවිතය නිසා Buffer PRL1 හෝ Buffer PSL1 මගින් සෛලවල අසම්පූර්ණ නියැදි ඛණ්ඩනය හෝ අසම්පූර්ණ ඛාදනය ඇති වන අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස පිරිසිදු කිරීමේ මෙහෙයුම් සඳහා අවහිර වූ පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවක් ඇති වේ.ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය ක්රියාත්මක කරන ලද නියැදියක තනි පිරිසිදු කිරීමකට ආරම්භක උපරිමය 50 mg වේ.පොලිෆෙනෝල් පොලිසැකරයිඩවල ශාක සාම්පල සඳහා, ඔබ ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය උත්සාහ කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු.
4. කේන්ද්රාපසාරී උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුය.
නියැදි පටකවල ද්‍රව නයිට්‍රජන් කඩාකප්පල් කිරීම හැර සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කිරීම සහ පිරිසිදු කිරීම, සියලුම පියවර කාමර උෂ්ණත්වයේ දී (20-25 °C) සිදු කෙරේ.සමහර අඩු-උෂ්ණත්ව කේන්ද්රාපසාරී වල 20 °Cට වඩා අඩු උෂ්ණත්වයක් ඇති අතර එමඟින් DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ සහ/හෝ RNA-පමණක් තීරුවේ අවහිරතා ඇති විය හැක.මෙය සිදුවුවහොත්, කේන්ද්රාපසාරී උෂ්ණත්වය 20-25 °C දක්වා සකසන්න සහ ලයිසිස් මිශ්‍රණය සහ/හෝ එතනෝල් වෙන්කිරීමේ අධි ප්රවාහය 37 °Cට එකතු කිරීම පෙර-උණුසුම් කරන්න.
RNA නිස්සාරණයක් හෝ RNA අස්වැන්නක් අඩු නොවේ
සාමාන්‍යයෙන් ප්‍රතිසාධන කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන බොහෝ සාධක ඇත, එනම්: නියැදි RNA අන්තර්ගතය, මෙහෙයුම් ක්‍රමය, ඉවත් කිරීමේ පරිමාව යනාදිය.
පහත දැක්වෙන පොදු හේතු විශ්ලේෂණය:
1. මෙහෙයුම අතරතුර අයිස් ස්නානය හෝ අඩු උෂ්ණත්වය (4 ° C) කේන්ද්රාපසාරී සිදු කරන ලදී.
යෝජනාව: සම්පූර්ණ ක්‍රියාවලියේදී කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ° C) ක්‍රියා කරන්න, අයිස් ස්නානය සහ අඩු උෂ්ණත්ව කේන්ද්රාපසාරී කිරීම නොකරන්න.
2.සාම්පලයේ නුසුදුසු සංරක්ෂණය හෝ නියැදිය දිගු කාලීනව සංරක්ෂණය කිරීම හේතුවෙන් RNA ක්ෂය වී ඇත.
නිර්දේශය: අලුතින් එකතු කරන ලද සාම්පල ඉක්මනින් දියර නයිට්‍රජන් වල ශීත කළ යුතු අතර පසුව -80 ° C දී දිගු කාලයක් ගබඩා කළ යුතුය, නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ දියවීම වළක්වා ගත යුතුය;හෝ වහාම සාම්පල RNA ස්ථායීකාරක RNAlater ද්‍රාවණයේ (සත්ව සාම්පල) පොඟවා ගන්න.
3.ප්‍රමාණවත් නොවන නියැදි ඛණ්ඩනය සහ ලයිසිස් පවිත්ර කිරීමේ තීරුව අවහිර කිරීමට හේතු වේ.
යෝජනාව: පටක ඇඹරීමේදී, කරුණාකර පටක ප්‍රමාණවත් ලෙස ඇඹරී ඇති බව සහතික කර, එය ඉක්මනින් පෙර සූදානම් කළ බෆර් PSL1 වෙත මාරු කරන්න (β-ME හි නිවැරදි අනුපාතය එකතු කර ඇති බව තහවුරු කරන්න, ක්‍රියා පටිපාටියේ 1 පියවර බලන්න).
4.ප්‍රවාහකය වැරදි ලෙස එකතු කර ඇත.
යෝජනාව: RNase-Free ddH බව සහතික කර ගන්න2පිරිසිදු කිරීමේ තීරු පටලයේ මැදට O බිංදු දමනු ලැබේ.
5.නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව Buffer PSL2 හෝ Buffer PRW2 වෙත එකතු කර නොමැත.
යෝජනාව: කරුණාකර උපදෙස් අනුගමනය කරන්න, නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව Buffer PSL2 සහ Buffer PRW2 වෙත එකතු කර කට්ටලය භාවිතා කිරීමට පෙර හොඳින් මිශ්‍ර කරන්න.
6. පටක සාම්පල ප්‍රමාණය නුසුදුසුය.
යෝජනාව: Buffer PSL1 500 μl සඳහා පටක 50 mg භාවිතා කරන්න.වැඩිපුර පටක භාවිතා කිරීමෙන් නිස්සාරණය කරන RNA ප්‍රමාණය අඩු වන අතර ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ලැබෙන RNA වල සංශුද්ධතාවය ද අඩු වේ.RNA නිස්සාරණය කිරීමේ මෙහෙයුමකට මූලික නියැදි මාත්‍රාව 50 mg නොඉක්මවිය යුතු බව අපි තරයේ නිර්දේශ කරමු.
7. නුසුදුසු elution පරිමාව හෝ අසම්පූර්ණ elution.
යෝජනාව: පවිත්ර කිරීමේ තීරුවේ elluent පරිමාව 50-200 μl;ඉවත් කිරීමේ බලපෑම සෑහීමකට පත් නොවන්නේ නම්, පෙර රත් කළ RNase-Free ddH එකතු කිරීමෙන් පසු කාමර උෂ්ණත්වයේ කාලය දීර්ඝ කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.2O, විනාඩි 5-10 වැනි.
8.Buffer PRW2 සමඟ සේදීමෙන් පසු පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ එතනෝල් අවශේෂ ඇත.
යෝජනාව: හිස් බටය විනාඩි 1ක් කේන්ද්රාපසාරී කර ඇති අතර, බෆර් PRW2 තුළ සේදීමෙන් පසු එතනෝල් ඉතිරිව තිබේ නම්, ඔබට හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී කාලය විනාඩි 2 දක්වා වැඩි කළ හැකිය, නැතහොත් ඉතිරි එතනෝල් සම්පූර්ණයෙන්ම ඉවත් කිරීමට කාමර උෂ්ණත්වයේ විනාඩි 5 ක් පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව තැබිය හැකිය.
9. කට්ටලය වැරදි ලෙස භාවිතා කර ඇත.
යෝජනාව: පොලිෆෙනොලික් පොලිසැකරයිඩවල ශාක සාම්පල සඳහා, ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය වැනි පොදු කට්ටල භාවිතා කිරීමෙන් පරිපූර්ණ RNA සාම්පල ලබා ගැනීමට නොහැකි විය හැක.Polyphenolic polysaccharide ශාක සාම්පල සඳහා විෙශේෂෙයන් නිර්මාණය කර ඇති Plant Total RNA IsolationKit Plus භාවිතා කරන ලෙස අපි ඔබට නිර්දේශ කරමු.පොලිෆෙනෝල් සහ පොලිසැකරයිඩ ශාක සාම්පල වලින් RNA නිස්සාරණය කිරීම සඳහා විෙශේෂෙයන් සකස් කරන ලද කට්ටලයක්.
OD260/OD280 අගය අඩුයි
ddH සමඟ RNA ඉවත් කිරීම2O සහ වර්ණාවලීක්ෂ දර්ශක කියවීම් සඳහා භාවිතා කිරීම අඩු OD260/OD280 අගයන් ඇති කරයි.අපි නිර්දේශ කරන්නේ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (RNase-Free ddH වෙනුවට2O සිට elute RNA දක්වා) සාපේක්ෂ නිවැරදි OD260/OD280 අගයන් ලබා ගැනීමට, 19 පිටුවේ "RNA සාන්ද්‍රණය සහ පවිත්ර කිරීමේ පරීක්ෂණ" බලන්න.
පිරිසිදු RNA ක්ෂය වේ
පිරිසිදු RNA වල ගුණාත්මක භාවය සාම්පල සංරක්ෂණය, RNase දූෂණය සහ හැසිරවීම වැනි සාධක වලට සම්බන්ධ වේ.
පොදු හේතු විශ්ලේෂණය:
1. පටක සාම්පල එකතු කිරීමෙන් පසු නියමිත වේලාවට ගබඩා කර නොමැත.
නිර්දේශය: පටක සාම්පල එකතු කිරීමෙන් පසු නියමිත වේලාවට භාවිතා නොකරන්නේ නම්, කරුණාකර ඒවා වහාම අඩු උෂ්ණත්වයේ දී ද්‍රව නයිට්‍රජන් වල ගබඩා කරන්න හෝ ද්‍රව නයිට්‍රජන් වල ඉක්මනින් ශීත කළ පසු දිගු කාලීන ගබඩා කිරීම සඳහා -80 ° C වෙත මාරු කරන්න, නැතහොත් සාම්පල වහාම RNA ස්ථායීකාරක RNAlater ද්‍රාවණයේ (සත්ව සාම්පල) ගිල්වන්න.RNA නිස්සාරණය සඳහා, අලුතින් එකතු කරන ලද පටක සාම්පල භාවිතා කිරීමට උත්සාහ කරන්න.
2. පටක සාම්පල නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ දියවීම.
යෝජනාව: පටක සාම්පල ගබඩා කිරීමේදී, ඒවා සංරක්ෂණය සඳහා කුඩා කැබලිවලට කපා, ඒවා භාවිතා කරන විට, සාම්පල නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ දියවීම නිසා ඇතිවන RNA ක්ෂය වීම වළක්වා ගැනීම සඳහා ඒවායින් කොටසක් පිටතට ගැනීම වඩාත් සුදුසුය.
3.RNase මෙහෙයුම් මැදිරිය තුළ හඳුන්වා දෙනු ලැබේ හෝ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම්, මුහුණු ආවරණ ආදිය පැළඳ නැත.
යෝජනාව: RNA නිස්සාරණය කිරීමේ අත්හදා බැලීම් වඩාත් හොඳින් සිදු කරනු ලබන්නේ වෙනම RNA මෙහෙයුම් වලදී වන අතර, පරීක්ෂණයට පෙර රසායනාගාර මේසය පිරිසිදු කළ යුතු අතර, RNase හඳුන්වාදීමෙන් සිදුවන RNA ක්ෂය වීම වළක්වා ගැනීම සඳහා අත්හදා බැලීමේදී ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් සහ මුහුණු ආවරණ පැළඳිය යුතුය.
4.ප්‍රතික්‍රියාකාරකය භාවිතයේදී RNase මගින් දූෂිත වේ.
යෝජනාව: අදාළ අත්හදා බැලීම් සඳහා ශාක සම්පූර්ණ RNA නිස්සාරණ කට්ටල නව මාලාවක් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
5.ආර්එන්ඒ හැසිරවීම සඳහා භාවිතා කරන කේන්ද්රාපසාරී නල සහ පයිප්ප ඉඟි RNase සමඟ දූෂිත වේ.
යෝජනාව: RNA නිස්සාරණයේදී භාවිතා කරන කේන්ද්රාපසාරී නල, පයිප්ප ඉඟි, පයිප්ප ආදිය සියල්ල RNase-නිදහස් බව සහතික කර ගන්න.
උපදෙස් අත්පොත්:
