QuickEasyᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
විස්තර
2× ඉක්මන් පහසුයිTMQuickEasy විසින් සපයන ලද සැබෑ PCR Mix-TaqmanTMතත්ය කාලීන PCR Kit-Taqman කට්ටලය යනු විශේෂිත ප්රතිදීප්ත පරීක්ෂණ භාවිතා කරමින් තත්ය කාලීන PCR විස්තාරණ ප්රතික්රියාව සඳහා නිර්මාණය කර ඇති නව පරම්පරාවේ ප්රධාන මිශ්ර පද්ධතියකි.එහි මූලික Foregene HS Taq DNA Polymerase ප්රතිදේහ වෙනස් කිරීම මත පදනම් වී ඇත, Foregene තව දුරටත් ප්රශස්ත PCR පද්ධතිය සමඟ ඒකාබද්ධව භාවිතා කරයි, ඉහළ නිශ්චිතතාවයක් සහ විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාවයක් ඇත.සාමාන්ය PCR මිශ්රණය සමඟ සසඳන විට, එය ශක්තිමත් විස්තාරණ හැකියාවක් සහ අඩු නොගැලපීම් අනුපාතයක් ඇත.එය විශේෂිත නොවන විස්තාරණය අඩු කිරීමට සහ PCR හි නිරවද්යතාවය වැඩි දියුණු කිරීමට ප්රතිදීප්ත ප්රමාණාත්මක PCR ප්රතික්රියාවේදී භාවිතා කළ හැක.එය නිෂ්පාදනයේ විශේෂත්වය සහ ප්රතික්රියා සංවේදීතාව බෙහෙවින් වැඩි දියුණු කළ හැකිය.ඒ සමගම, ROX අභ්යන්තර යොමු සායම් ලෙස ලබා දෙන ලදී.
ඉක්මන් පහසුයිTMReal Time PCR Kit-Taqman කට්ටලයට අච්චු ප්රමාණයට පුළුල් පරාසයක යෙදීම් ඇති අතර විවිධ ප්රමාණාත්මක කලාපවල හොඳ සම්මත වක්රයක් ලබා ගත හැකි අතර හොඳ පුනරාවර්තන හැකියාවක් සහ ඉහළ විශ්වාසයක් ඇතිව ඉලක්කගත ජාන නිවැරදිව ප්රමාණනය කර හඳුනා ගත හැක.
පිරිවිතර
සූදානම් කිරීම් 200,සූදානම් කිරීම් 500,සූදානම් කිරීම් 1000,2000 සූදානම්
කට්ටල සංරචක
ඉක්මන් පහසුයිTMරියල් ටයිම් PCR Kit-Taqman(20μlපද්ධති) | ||||
කට්ටලයේ අන්තර්ගතය | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 සූදානම් | 500 සූදානම් | 1000 සූදානම් | 2000 සූදානම් | |
2×ඉක්මන්පහසුTM සැබෑ PCR මිශ්ර කරන්න- තක්මාන් | 1 මිලි×2 | 1.7 මිලි×3 | 1.7 මිලි×6 | 1.7 මිලි×12 |
20×ROX යොමු ඩයි | 200μL | 0.5 මිලි | 1 මිලි | 1 මිලි×2 |
DNase-නිදහස් ddH2O | 1.7 මිලි | 1.7 මිලි×2 | 10 මිලි | 20 මිලි |
IFU | 1කෑල්ලක් | 1කෑල්ලක් | 1කෑල්ලක් | 1කෑල්ලක් |
විශේෂාංග සහ වාසි
■ අද්විතීය PCR ප්රශස්තිකරණ පද්ධතිය 2×QuickEasy කරයිTMReal PCR Mix-Taqman වඩාත් ගැළපේ.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase හි ඉහළ විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාව, ඉහළ විස්තාරණ සංවේදීතාව සහ ඉහළ විස්තාරණ විශේෂත්වය ඇත.
■ 2× ඉක්මන් පහසුයිTM Real PCR Mix -Taqman අනුක්රමික-විශේෂිත පරීක්ෂණ හඳුනාගැනීමේ සංවේදීතාව සහ නිශ්චිතභාවය වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා Foregene විසින් ප්රශස්ත කරන ලද අද්විතීය පද්ධතියක් භාවිතා කරයි, එය ප්රවේණිගත කිරීම සහ පිටපත් කිරීමේ සංඛ්යා විචලනය නිර්ණය කිරීම සහ නිවැරදි ප්රතිඵල ලබා ගැනීම සඳහා භාවිතා කළ හැක.
■ මෙම නිෂ්පාදනය ROX අභ්යන්තර සමුද්දේශ සායම් සමඟ එන අතර, සංඥා පසුබිම සහ ළිං අතර සංඥා දෝෂ ඉවත් කිරීමට භාවිතා කළ හැකි අතර, පාරිභෝගිකයින්ට විවිධ වර්ගයේ ප්රමාණාත්මක PCR උපකරණ භාවිතා කිරීමට පහසු වේ.
කට්ටල යෙදුම
■ අච්චු ප්රමාණාත්මක විශ්ලේෂණය සඳහා ප්රතිදීප්ත ප්රමාණාත්මක PCR;
■ සීසාම්ප්රදායික PCR විස්තාරණය;
■ ඇලිලේ හඳුනාගැනීම සඳහා භාවිතා කළ හැක.
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීම
කට්ටලය අඳුරේ -20 ° C දී ගබඩා කළ යුතුය;එය නිතර භාවිතා කරන්නේ නම්, එය කෙටි කාලයක් සඳහා 4 ° C දී ගබඩා කළ හැක (දින 10 ක් ඇතුළත භාවිතා කරන්න).
රියල් ටයිම් PCR ප්රයිමර් සැලසුම් මූලධර්ම
Forward Primer සහ Reverse Primer
රියල් ටයිම් PCR සඳහා, ප්රාථමික නිර්මාණය ඉතා වැදගත් වේ.ප්රයිමර් PCR විස්තාරණයේ විශේෂත්වය සහ කාර්යක්ෂමතාවයට සම්බන්ධ වන අතර පහත සඳහන් මූලධර්මවලට අදාළව නිර්මාණය කළ හැක:
ප්රාථමික දිග: 18-30bp.
GC අන්තර්ගතය: 40-60%.
Tm අගය: Primer 5 වැනි ප්රයිමර් නිර්මාණ මෘදුකාංග, ප්රාථමිකයේ Tm අගය ලබා දිය හැක.ඉහළ සහ පහළ ප්රාථමික වල Tm අගයන් හැකි තරම් සමීප විය යුතුය.Tm ගණනය කිරීමේ සූත්රය ද භාවිතා කළ හැක: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR සිදු කරන විට, ප්රාථමික Tm අගය 5 °C ට වඩා අඩු උෂ්ණත්වයක් සාමාන්යයෙන් annealing උෂ්ණත්වය ලෙස තෝරා ගනු ලැබේ (නිවාරණ උෂ්ණත්වයේ අනුරූප වැඩි වීම PCR ප්රතික්රියාවේ විශේෂත්වය වැඩි කළ හැක).
ප්රයිමර් සහ PCR නිෂ්පාදන:
සැලසුම් ප්රයිමර් PCR විස්තාරණ නිෂ්පාදන දිග වඩාත් සුදුසු වන්නේ 100-150bp වේ.
සැකිල්ලේ ද්විතියික ව්යුහාත්මක ප්රදේශයේ සැලසුම් ප්රයිමර් හැකිතාක් දුරට වැළැක්විය යුතුය.
ඉහළ සහ පහළ ප්රයිමර් වල 3′ අන්ත අතර අනුපූරක පාද 2ක් හෝ වැඩි ගණනක් සෑදීමෙන් වළකින්න.
ප්රයිමර් 3′ පර්යන්ත පාදය අතිරේක අනුගාමී G හෝ C 3ක් සමඟ පැවතිය නොහැක.
ප්රයිමර් වලට අනුපූරක ව්යුහයන් තිබිය නොහැක, එසේ නොමැතිනම් හිසකෙස් ව්යුහයක් සාදනු ඇත, එය PCR විස්තාරණයට බලපායි.
ATCG ප්රාථමික අනුපිළිවෙලෙහි හැකිතාක් ඒකාකාරව බෙදා හැරිය යුතු අතර, 3′ පර්යන්ත පදනම T ලෙස වැළැක්විය යුතුය.
උපග්රන්ථය 1: සෛල සෘජු RT-qPCR කට්ටල සංරචක අතිරේක ඇසුරුම
1.සෛල ලයිසිස් විසඳුම
| |||
කට්ටල සංරචක (24-ළිං ලයිසිස් පද්ධතිය / ළිඳ) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
ටී 100 | ටී 500 | ||
කොටසමම | බෆර් CL | 20 මිලි | මිලි ලීටර් 100 යි |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
බෆර් ST | 1 ml × 2 | 10 මිලි | |
කොටසII | DNA මකනය | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT මිශ්රණය
| |
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01011-B1 |
ටී 200 | |
5× සෘජු RT මිශ්රණය | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
| ||
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
ටී 200 | ටී 1000 | |
2× සෘජු qPCR මිශ්රණය-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
50× ROX යොමු ඩයි | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 මිලි | 10 මිලි |