ගැටළු විශ්ලේෂණ මාර්ගෝපදේශය

පහත දැක්වෙන්නේ වෛරස් DNA/RNA නිස්සාරණය කිරීමේදී ඇතිවිය හැකි ගැටළු පිළිබඳ විශ්ලේෂණයකි, ඔබේ අත්හදා බැලීම් සඳහා ප්‍රයෝජනවත් වනු ඇතැයි බලාපොරොත්තු වේ.මීට අමතරව, මෙහෙයුම් උපදෙස් සහ ගැටළු විශ්ලේෂණය හැර වෙනත් පර්යේෂණාත්මක හෝ තාක්ෂණික ගැටළු සඳහා, අපි ඔබට උපකාර කිරීමට තාක්ෂණික සහාය කැප කර ඇත.ඔබට කිසියම් අවශ්‍යතාවයක් ඇත්නම්, කරුණාකර අප අමතන්න: 028-83360257 හෝ විද්‍යුත් තැපෑල:

Tech@foregene.com.

න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය හෝ අඩු න්‍යෂ්ටික අම්ල අස්වැන්නක් නොමැත

සාමාන්‍යයෙන් ප්‍රතිසාධන කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන බොහෝ සාධක ඇත, එනම්: නියැදි න්‍යෂ්ටික අම්ල අන්තර්ගතය, මෙහෙයුම් ක්‍රමය, ඉවත් කිරීමේ පරිමාව යනාදිය.

පොදු හේතු විශ්ලේෂණය:

1. ක්රියා පටිපාටිය අතරතුර අයිස් ස්නානය හෝ අඩු උෂ්ණත්වය (4 ° C) කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන ලදී.

යෝජනාව: සම්පූර්ණ ක්‍රියාවලිය පුරාම කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ° C) ක්‍රියා කරන්න, අයිස් ස්නානය සහ අඩු උෂ්ණත්ව කේන්ද්‍රාපසාරී නොකරන්න.

2. නියැදිය නුසුදුසු ලෙස ගබඩා කර තිබීම හෝ නියැදිය වැඩි කාලයක් ගබඩා කර ඇත.

නිර්දේශය: -80 ° C දී සාම්පල ගබඩා කර නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ දියවීම වැළැක්වීම;න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය සඳහා නැවුම්ව එකතු කරන ලද සාම්පල භාවිතා කිරීමට උත්සාහ කරන්න.

3. ප්‍රමාණවත් නොවන නියැදි ලිසිස්.

නිර්දේශය: කරුණාකර නියැදිය සහ ලයිසිස් ක්‍රියාකාරී ද්‍රාවණය තරයේ මිශ්‍ර කර කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ° C) විනාඩි 10 ක් සඳහා පුර්වගත කර ඇති බවට සහතික වන්න.

4. එලියුන්ට් වැරදි ලෙස එකතු කිරීම.

යෝජනාව: RNase-Free ddH2O පවිත්‍ර කිරීමේ තීරු පටලයේ මැදට පහතට එකතු කර ඇති බවට වග බලා ගන්න, එය පිරිසිදු කිරීමේ තීරු වළල්ලට නොයන්න.

5. නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව Buffer RW2 වෙත එකතු කර නොමැත.

යෝජනාව: කරුණාකර උපදෙස් අනුගමනය කරන්න, බෆර් RW2 වෙත නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කර කට්ටලය භාවිතා කිරීමට පෙර හොඳින් මිශ්ර කරන්න.

6. නුසුදුසු නියැදි පරිමාව.

යෝජනාව: බෆර් DRL සෑම 500µl සඳහාම නියැදි 200µl සකසනු ලැබේ.අධික නියැදි සැකසීමේ ප්‍රතිඵලයක් ලෙස න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය අඩු වේ.

7. නුසුදුසු elution පරිමාව හෝ අසම්පූර්ණ elution.

නිර්දේශය: පවිත්ර කිරීමේ තීරුවේ දියරමය පරිමාව 30-50μl;ඉවත් කිරීමේ බලපෑම සතුටුදායක නොවේ නම්, විනාඩි 5-10ක් වැනි පෙර රත් කළ RNase-Free ddH2O එකතු කිරීමෙන් පසු කාමර උෂ්ණත්වයේ දී කාලය දීර්ඝ කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.

8. බෆර් RW2 සමඟ සේදීමෙන් පසු එතනෝල් තීරුව මත පවතී.

යෝජනාව: Buffer RW2 සමඟ කේන්ද්‍රාපසාරී කිරීමෙන් පසු එතනෝල් මිනිත්තු 2ක් පවතී නම්, ඉතිරි එතනෝල් සම්පූර්ණයෙන්ම ඉවත් කිරීමට තීරුව කේන්ද්‍රාපසාරී කිරීමෙන් පසු විනාඩි 5ක් කාමර උෂ්ණත්වයේ තැබිය හැක.

පිරිසිදු කරන ලද න්යෂ්ටික අම්ලය දිරාපත් වේ

පිරිසිදු කරන ලද න්යෂ්ටික අම්ලයේ ගුණාත්මකභාවය නියැදිය සංරක්ෂණය කිරීම, RNase දූෂණය, ක්රියාකාරිත්වය සහ අනෙකුත් සාධක වලට සම්බන්ධ වේ.පොදු හේතු විශ්ලේෂණය:

1. එකතු කරන ලද සාම්පල නියමිත වේලාවට ගබඩා කර නොමැත.

යෝජනාව: නියැදිය එකතු කිරීමෙන් පසු නියමිත වේලාවට භාවිතා නොකළේ නම්, කරුණාකර එය වහාම අඩු උෂ්ණත්වයකදී -80 ° C දී ගබඩා කරන්න.RNA නිස්සාරණය සඳහා, අලුතින් එකතු කරන ලද සාම්පල භාවිතා කිරීමට උත්සාහ කරන්න.

2. සාම්පල එකතු කර නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ දියවීම.

යෝජනාව: සාම්පල එකතු කිරීමේදී සහ ගබඩා කිරීමේදී කැටි කිරීම සහ දියවීම (එක් වරකට වඩා නොවේ) වළකින්න, එසේ නොමැති නම් න්‍යෂ්ටික අම්ල අස්වැන්න අඩු වේ.

3. RNase මෙහෙයුම් කාමරය තුළ හඳුන්වා දෙනු ලැබේ හෝ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම්, වෙස් මුහුණු ආදිය පැළඳ නොගනී.

නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණය කිරීමේ පරීක්ෂණ වඩාත් හොඳින් සිදු කරනු ලබන්නේ වෙනම RNA මෙහෙයුම් කාමරයක වන අතර, පරීක්ෂණයට පෙර රසායනාගාර මේසය පිරිසිදු කළ යුතුය.

RNase හඳුන්වාදීමෙන් ඇති වන RNA හායනය උපරිමයෙන් වළක්වා ගැනීම සඳහා අත්හදා බැලීමේදී ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් සහ වෙස්මුහුණු පළඳින්න.

4. භාවිතයේදී ප්‍රතික්‍රියාකාරකය RNase සමඟ දූෂිත විය.

නිර්දේශය: අදාළ පරීක්ෂණ සඳහා නව වෛරස් DNA/RNA හුදකලා කට්ටලයක් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.

5. RNA හැසිරවීම සඳහා භාවිතා කරන කේන්ද්‍රාපසාරී නල සහ පයිප්ප ඉඟි RNase සමඟ දූෂණය වී ඇත.

යෝජනාව: RNA නිස්සාරණය සඳහා භාවිතා කරන කේන්ද්‍රාපසාරී නල, පයිප්ප ඉඟි, පයිප්ප ආදිය සියල්ල RNase-නිදහස් බව සහතික කර ගන්න.

පිරිපහදු කළ න්‍යෂ්ටික අම්ලය පහළ පර්යේෂණවලට බලපායි

පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව මගින් පිරිසිදු කරන ලද DNA සහ RNA, ලවණ අයන සහ ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය ඉතා ඉහළ නම්, එය පහළ ධාරාවේ පරීක්ෂණවලට බලපානු ඇත, එනම්: PCR විස්තාරණය, ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම යනාදිය.

1. ඉවත් කරන ලද DNA සහ RNA වල අවශේෂ ලුණු අයන ඇත.

යෝජනාව: නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව බෆර් RW2 වෙත එකතු කර ඇති බවට වග බලා ගන්න, සහ මෙහෙයුම් උපදෙස් වල දක්වා ඇති කේන්ද්‍රාපසාරී වේගයෙන් පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව දෙවරක් සෝදන්න;ලුණු අයන දූෂණය අවම කිරීම සඳහා කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන්න.

2. ඉවත් කරන ලද DNA සහ RNA වල එතනෝල් අවශේෂ ඇත.

යෝජනාව: බෆර් RW2 සමඟ සේදීම තහවුරු කිරීමෙන් පසුව, මෙහෙයුම් උපදෙස් වල කේන්ද්රාපසාරී වේගයෙහි හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන්න;එතනෝල් අපද්‍රව්‍ය තවමත් තිබේ නම්, ඔබට හිස් නළය කේන්ද්‍රාපසාරී කර විනාඩි 5ක් කාමර උෂ්ණත්වයේ තබා එතනෝල් අපද්‍රව්‍ය උපරිමයෙන් ඉවත් කළ හැකිය.

උපදෙස් අත්පොත්:

වෛරස් DNA සහ RNA හුදකලා කට්ටල උපදෙස් අත්පොත