PCR හි උපත
PCR (පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව)
පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව සොයා ගෙන වසර 30 කට වැඩි කාලයක් ගත වී ඇත.වසර 30 කට වැඩි කාලයක්, ලොව පුරා සිටින බොහෝ විද්වතුන් අඛණ්ඩව අතිරේකව සහ වැඩිදියුණු කිරීමෙන් පසුව, PCR තාක්ෂණය සමස්ත ජීවිත විද්‍යා ක්ෂේත්‍රයේ වඩාත් පුළුල් ලෙස සහ නිතර භාවිතා වන සහ වඩාත්ම වැදගත් මූලික පර්යේෂණ ක්‍රමය බවට පත්ව ඇත.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR යනාදිය සාම්ප්රදායික PCR තාක්ෂණයේ පුළුල් භාවිතයේ පදනම මත සංවර්ධනය කරන ලද මෙන්ම අලුතින් බිහි වූ ඩිජිටල් PCR (ඩිජිටල් PCR) බහුතර විද්‍යාත්මක පර්යේෂකයන්ගේ පර්යේෂණ ක්‍රම විශාල ලෙස පොහොසත් කර ඇත.
සාම්ප්රදායික PCR තාක්ෂණයේ දෝෂ
සංකීර්ණ න්යෂ්ටික අම්ල වෙන් කිරීම සහනිස්සාරණය:
★ සම්ප්‍රදායික PCR තාක්ෂණය: අවශ්‍යයි
★ PCR ව්‍යුත්පන්න තාක්ෂණය: අවශ්‍යයි
★ DNA සහ RNA සාම්පල: විශාල වෙනස්කම්, දුෂ්කර මෙහෙයුම් අවශ්යතා
★ ශරීර උපද්‍රව: විෂ ප්‍රතික්‍රියාකාරක ශරීරයට හානි කරයි
සාම්ප්රදායික PCR තාක්ෂණය සහ ව්‍යුත්පන්න තාක්‍ෂණයට පූර්ව අවශ්ය-න්යෂ්ටික අම්ල වෙන් කිරීම සහ පිරිසිදු කිරීම ඇත.
PCR තාක්ෂණයේ අවශ්යතා සපුරාලන න්යෂ්ටික අම්ල සාම්පල ලබා ගැනීම සඳහා ඕනෑම ජීව විද්‍යාත්මක සාම්පලයක් සංකීර්ණ හා වෙහෙසකර නියැදි සැකසුම් මාලාවක් හරහා යා යුතුය.
DNA සහ RNA වෙන් කිරීම සහ නිස්සාරණය කිරීම සැමවිටම අදාළ විද්‍යාත්මක පර්යේෂකයන් දිනපතා පුනරාවර්තනය කළ යුතු මූලික කාර්යයකි.
සාම්පල අතර ඇති විශාල වෙනස්කම් නිසා DNA සහ RNA වෙන් කිරීම සහ නිස්සාරණය කිරීමේ ක්‍රියාවලීන් ද බෙහෙවින් වෙනස් ය.මෙම කාර්යය සඳහා ක්රියාකරුවන් සඳහා ඉහළ මට්ටමේ තාක්ෂණික ප්රවීණතාවයක් අවශ්ය වේ.සාම්ප්රදායික වෙන්කිරීම් සහ නිස්සාරණ ක්‍රමවේදවලට සමහර අධික විෂ සහිත රසායනික ප්‍රතික්‍රියාකාරක සමඟ දිගුකාලීන සම්බන්ධතා අවශ්ය වේ.එය ක්‍රියාකරුගේ ශරීරයට ආපසු හැරවිය නොහැකි හානියක් සිදු කරනු ඇති අතර, අත්හදා බැලීමේදී සෘජු හානි පවා සිදු කරයි.
ඒ සමගම, අධ්යයනය කිරීම සඳහා සාම්පල විශාල සංඛ්යාවක් ඇති අය සඳහා, න්යෂ්ටික අම්ල වෙන් කිරීම සහ නිස්සාරණය කිරීම ශ්රම-දැඩි කාර්යයකි.
වෙළඳපොලේ ඇති න්යෂ්ටික අම්ල හුදකලා සහ නිස්සාරණ කට්ටල දැන් පරිණත වී ඇති අතර බොහෝ වෙළඳ නාම ඇත, නමුත් ඒවා දළ වශයෙන් සමාන වේ.එය සිලිකා ජෙල් පටල තීරු කේන්ද්‍රාපසාරී කට්ටලයක් හෝ චුම්බක පබළු ක්‍රම කට්ටලයක් වේවා, එය බොහෝ කාලයක් ගත වන අතර මිල අධික වේ.කට්ටලයේ පිරිවැයට අමතරව රසායනාගාර උපකරණ සඳහා විශේෂ අවශ්යතා ද තිබේ.චුම්බක පබළු ක්‍රමයේ භාවිතා කරන ස්වයංක්‍රීය වැඩපොළ ඉතා සාමාන්‍ය මහා පරිමාණ ඉහළ වටිනාකමකින් යුත් උපකරණයක් වන අතර එය රසායනාගාරයට විශාල වියදමක් දරයි.
සාරාංශයකින්
PCR අත්හදා බැලීම් කිරීමට පෙර, සාම්පල පූර්ව ප්‍රතිකාර කිරීම පර්යේෂකයන්ට නොවැළැක්විය හැකි සහ සැමවිටම හිසරදයකි.මෙම ගැටළුව විසඳන්නේ කෙසේද සහ න්යෂ්ටික අම්ල වෙන් කිරීම සහ නිස්සාරණය කිරීමකින් තොරව PCR පරීක්ෂණ සිදු කළ හැකිද යන්න බොහෝ විද්‍යාත්මක පර්යේෂකයන්ගේ සහ සායනික රසායනාගාර සේවකයින්ගේ අදහසයි.
Foregene විසඳුම
Direct PCR තාක්ෂණය සහ ඒ ආශ්‍රිත කට්ටල පිළිබඳ වසර ගණනාවක වෙහෙසකර පර්යේෂණවලින් පසුව, ෆෝජීන් බොහෝ බාධක බිඳ දමා, පර්යේෂකයන්ට න්යෂ්ටික අම්ල න්යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණයෙන් මිදීමට ඉඩ සලසමින් ප්‍රබල ප්‍රතිරෝධය සහ අනුවර්තනය වීමේ හැකියාව ඇති විවිධ සාම්පල සඳහා සෘජු PCR සාර්ථකව ලබා ගත්තේය.මෙය සෑම කෙනෙකුගේම ශ්රම තීව්‍රතාවය බෙහෙවින් අඩු කරයි, අත්හදා බැලීමේ ක්‍රියාවලිය වේගවත් කරයි, සහ විද්‍යාත්මක පර්යේෂණ සහ පරීක්ෂණ වියදම් ඉතිරි කරයි.
DirectPCR පිළිබඳ Forgene ගේ අවබෝධය සහ දැනුම
පළමුව, DirectPCR තාක්ෂණය යනු විවිධ ජීව විද්‍යාත්මක සාම්පල පටක සඳහා සෘජු PCR තාක්ෂණයකි.මෙම තාක්ෂණික තත්ත්වය යටතේ, න්යෂ්ටික අම්ල වෙන් කිරීම සහ නිස්සාරණය කිරීම අවශ්ය නොවන අතර, පටක සාම්පල වස්තුව ලෙස සෘජුවම භාවිතා කරනු ලබන අතර, PCR ප්රතික්රියාව සඳහා ඉලක්කගත ජාන ප්රාථමික එකතු කරනු ලැබේ.
දෙවනුව, DirectPCR තාක්ෂණය සම්ප්‍රදායික DNA අච්චු විස්තාරණ තාක්‍ෂණයක් පමණක් නොව, RNA අච්චු ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ PCR ද ඇතුළත් වේ.
තෙවනුව, DirectPCR තාක්ෂණය පටක සාම්පල මත සාමාන්‍ය ගුණාත්මක PCR ප්රතික්රියා සෘජුවම සිදු කරනවා පමණක් නොව, තත්‍ය කාලීන qPCR ප්රතික්රියා ද ඇතුළත් වේ, ප්රතික්රියා පද්ධතියට පසුබිම් ප්‍රතිදීප්ත බාධාවලට ප්‍රතිරෝධය දැක්වීමට සහ ආවේණික ප්‍රතිදීප්ත නිවාදැමීම් වලට ප්‍රතිවිරෝධී කිරීමට ප්‍රබල හැකියාවක් අවශ්ය වේ.
හතරවනුව, DirectPCR තාක්ෂණය මගින් ඉලක්ක කර ඇති පටක සාම්පල සඳහා න්යෂ්ටික අම්ල සැකිලි මුදා හැරීම පමණක් අවශ්ය වන අතර PCR ප්‍රතික්‍රියාවට බාධා කරන ප්‍රෝටීන, පොලිසැකරයිඩ, ලුණු අයන ආදිය ඉවත් නොකරන්න.මේ සඳහා ප්රතික්රියා පද්ධතියේ ඇති න්යෂ්ටික අම්ල පොලිමරේස් සහ PCR මිශ්‍රණය විශිෂ්ට ප්‍රති-ප්‍රතිවර්තනය සහ අනුවර්තනය වීම අවශ්ය වන අතර සංකීර්ණ තත්ව යටතේ එන්සයිම ක්‍රියාකාරිත්වය සහ ප්‍රතිනිර්මාණ නිරවද්‍යතාවය සහතික කළ හැකිය.
පස්වනුව, DirectPCR තාක්ෂණය මගින් ඉලක්ක කර ඇති පටක සාම්පල කිසිදු න්යෂ්ටික අම්ල පොහොසත් කිරීමේ ප්‍රතිකාරයකට භාජනය කර නොමැති අතර, ප්රතික්රියා පද්ධතියේ අතිශය ඉහළ සංවේදීතාවයක් සහ විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාවයක් අවශ්ය වන අච්චු ප්‍රමාණය ඉතා කුඩා වේ.
නිගමනය
DirectPCR තාක්ෂණය PCR තාක්ෂණයේ උපතේ සිට පසුගිය වසර 30 තුළ සිදු වූ වැදගත්ම තාක්ෂණික වර්ධනයන් සහ නවෝත්පාදනයන්ගෙන් එකකි.Forgene මෙම තාක්ෂණයේ පුරෝගාමියෙකු සහ නවෝත්පාදකයෙකු ලෙස කටයුතු කරයි.
DirectPCR තාක්ෂණයේ යෙදුම් අපේක්ෂාව ඉතා පුළුල් ය.මෙම තාක්ෂණය අඛණ්ඩව වැඩිදියුණු කිරීම සහ ප්‍රවර්ධනය කිරීම නිසැකවම විද්‍යාත්මක පර්යේෂණ සහ පරීක්ෂණ කටයුතු සඳහා කඩාකප්පල්කාරී වෙනස්කම් ගෙන එනු ඇත.මෙය PCR තාක්ෂණික විප්ලවයකි.
පසු කාලය: පෙබරවාරි-21-2017
