සත්ව සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය සත්ව පටක සහ සෛල සඳහා සම්පූර්ණ RNA නිස්සාරණය සහ පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල
කට්ටල විස්තරය:
විවිධ සත්ව පටක වලින් ඉහළ සංශුද්ධතාවය සහ උසස් තත්වයේ සම්පූර්ණ RNA ඉක්මනින් හා කාර්යක්ෂමව නිස්සාරණය කරන්න.
RNA ක්ෂය වීම ගැන කරදර විය යුතු නැත.මුළු පද්ධතියම RNase-නිදහස් වේ
DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව භාවිතයෙන් DNA ඵලදායී ලෙස ඉවත් කරන්න
DNase එකතු නොකර DNA ඉවත් කරන්න
සරලයි - සියලුම මෙහෙයුම් කාමර උෂ්ණත්වයේ දී අවසන් වේ
වේගවත් - මෙහෙයුම විනාඩි 30 කින් අවසන් කළ හැකිය
ආරක්ෂිත - කාබනික ප්රතික්රියාකාරක භාවිතා නොවේ
ඉහළ සංශුද්ධතාවය-OD260/280≈1.8-2.1
කට්ටල විස්තර
සූදානම් කිරීම් 50 ක්, සූදානම් කිරීම් 200 ක්
මෙම කට්ටලය භාවිතා කරයිකැරකෙන තීරුව සහ සූත්රයඅපගේ සමාගම විසින් වැඩි දියුණු කරන ලද, ඉහළ කාර්යක්ෂමතාවයකින් විවිධ සත්ව පටක වලින් ඉහළ-පිරිසිදු සහ උසස් තත්ත්වයේ සම්පූර්ණ RNA ලබා ගත හැකිය. එය කාර්යක්ෂම DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවක් සපයයි, එය ඉතා පහසුවෙන් ප්‍රවේණික DNA සහ පටක ලයිසේට් වලින් වෙන් කර අවශෝෂණය කර ගත හැකි, සරල සහ කාලය ඉතිරි කරයි;RNA-පමණක් තීරුවට RNA කාර්යක්ෂමව බන්ධනය කළ හැකි අතර අනන්‍ය සූත්‍රයක් සමඟ එකවර සැකසිය හැක සාම්පල ගොඩක්.
මුළු පද්ධතියම RNase-නිදහස් වේ, එම නිසා නිස්සාරණය කරන ලද RNA ක්ෂය නොවේ;Buffer RW1, Buffer RW2 buffer Washing system, එවිට ලබාගත් RNA ප්‍රෝටීන්, DNA, අයන සහ කාබනික සංයෝග දූෂණයෙන් තොර වේ.
කට්ටල සංරචක
| සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලය | ||
| කට්ටල සංරචක | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 ටී | ටී 200 | |
| බෆරය RL1* | මිලි ලීටර් 25 | මිලි ලීටර් 100 |
| බෆරය RL2 | මිලි ලීටර් 15 | මිලි ලීටර් 60 |
| බෆරය RW1* | මිලි ලීටර් 25 | මිලි ලීටර් 100 |
| බෆරය RW2 | මිලි ලීටර් 24 | මිලි ලීටර් 96 |
| RNase-නිදහස් ddH2O | මිලි ලීටර් 10 | මිලි ලීටර් 40 |
| RNA-පමණි තීරුව | 50 | 200 |
| DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව | 50 | 200 |
| උපදෙස් අත්පොත | 1 කෑල්ලක් | 1 කෑල්ලක් |
නිෂ්පාදන තොරතුරු
| ආකෘතිය | ස්පින් තීරුව | පිරිසිදු කිරීමේ සංරචකය | Forgene තීරුව, ප්‍රතික්‍රියාකාරකය |
| ෆ්ලක්ස් | 1-24 සාම්පල | සූදානම අනුව කාලය | මිනිත්තු ~30 (සාම්පල 24) |
| කේන්ද්රාපසාරී | මේස කේන්ද්රාපසාරී | Pyrolysis වෙන් කිරීම | කේන්ද්රාපසාරී වෙන් කිරීම |
| නියැදිය | සත්ව පටක;සෛලය | සාම්පල ප්රමාණය | පටක: 10-20 mg;සෛලය:(1-5)×106 |
| එලියුෂන් පරිමාව | 50-200 μL | උපරිම පැටවීමේ පරිමාව | 850 μL |
විශේෂාංග සහ වාසි
■ RNA ක්ෂය වීම ගැන කරදර විය යුතු නැත;මුළු පද්ධතියම RNase-නිදහස් වේ
■ DNA භාවිතා කරන DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව ඵලදායී ලෙස ඉවත් කරන්න
■ DNase එකතු නොකර DNA ඉවත් කරන්න
■ සරල-සියලු මෙහෙයුම් කාමර උෂ්ණත්වයේ දී අවසන් වේ
■ වේගවත් මෙහෙයුම විනාඩි 30 කින් අවසන් කළ හැක
■ ආරක්ෂිත - කාබනික ප්රතික්රියාකාරක අවශ්ය නොවේ
■ ඉහළ සංශුද්ධතාවය -OD260/280≈1.8-2.1
කට්ටල යෙදුම
එය විවිධ නැවුම් හෝ ශීත කළ සත්ව පටක හෝ සංස්කෘතික සෛල වලින් සම්පූර්ණ RNA නිස්සාරණය කිරීම සහ පිරිසිදු කිරීම සඳහා සුදුසු වේ.
නිෂ්පාදන පරාමිතීන්
■ ප්‍රවාහයේ යෙදුම්: පළමු පෙළ cDNA සංස්ලේෂණය, RT-PCR, අණුක ක්ලෝනකරණය, උතුරු බ්ලොට්, ආදිය.
■ සාම්පල: සත්ව පටක, සංස්කෘතික සෛල
■ මාත්‍රාව: පටක 10-20mg, සෛල(2-5)×106
■ පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ උපරිම DNA බන්ධන ධාරිතාව: 80 μg
■ එලියුෂන් පරිමාව: 50-200 μl
රූප සටහන
සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලය 20mg ප්රතිකාර
නැවුම් මූසික සාම්පල, 5% පිරිසිදු කළ මුළු RNA 1% agar ගන්න
Glycogel විද්යුත් විච්ඡේදනය
1: ප්ලීහාව 2: වකුගඩු
3: අක්මාව 4: හදවත
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීමේ කාලය
කට්ටලය කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ℃) හෝ 2-8 ℃ වැඩි කාලයක් සඳහා මාස 24 ක් ගබඩා කළ හැක.Buffer RL1 β-mercaptoethanol (විකල්ප) එකතු කිරීමෙන් පසු මාස 1ක් සඳහා 4 ℃ හි ගබඩා කළ හැක.
උපුටා ගත් ලිපි
1.IF:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.මධ්යම සංයුක්ත නිර්මාණයේ ප්රශස්තකරණය හරහා අක්මාව පදනම් සංස්කරණය කිරීම සඳහා mRNA-පටවන ලද ලිපිඩ වැනි නැනෝ අංශු.නීතිඥකාර්යය.ද්රව්යය.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.චිකිත්සක ප්‍රාථමික සෛල සැකසීමේදී සෛලවල ස්වයංසිද්ධ ඇපොප්ටෝසිස් පොස්පටයිඩයිල්සෙරීන් මුදා හැරීම හරහා ප්‍රතිශක්තිකරණ බලපෑම් ඇති කරයි.සංඥා පරිවර්තන ඉලක්කය Ther.2021 ජූලි 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA වෙනස් කිරීම ඔන්කොජනික් mRNA පරිවර්තනය වැඩි දියුණු කරන අතර intrahepatic cholangiocarcinoma ප්‍රගතිය ප්‍රවර්ධනය කරයි.මෝල් සෛලය.2021 ජූලි 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-මැදිහත් වූ m6A වෙනස් කිරීම එන්ඩොප්ලාස්මික් රෙටිකුලම් හෝමියෝස්ටැසිස් පවත්වා ගැනීමෙන් අක්මාව පුනර්ජනනයට පහසුකම් සපයයි.සෛල Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
සඳහා RNA හුදකලා කට්ටල වෙනත් නියැදි මූලාශ්රලබා ගත හැක:
සෛල, ශාක, වෛරස්, රුධිරය, ආදිය.
RNA නිස්සාරණය නොකෙරේ හෝ RNA අස්වැන්න අඩු වේ
බොහෝ විට ප්‍රතිසාධන කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන විවිධ සාධක ඇත, එනම්: පටක සාම්පල RNA අන්තර්ගතය, ක්‍රියා කරන ක්‍රමය, ඉවත් කිරීමේ පරිමාව යනාදිය.
1. මෙහෙයුම අතරතුර අයිස් ස්නානය හෝ ක්‍රයොජනික් (4 °C) කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන ලදී.
නිර්දේශය: සම්පූර්ණ ක්‍රියාවලිය පුරාම කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ° C) ක්‍රියා කරන්න, අඩු උෂ්ණත්වවලදී අයිස් ස්නානය සහ කේන්ද්රාපසාරී නොකරන්න.
2. නුසුදුසු නියැදි සංරක්ෂණය හෝ අධික සාම්පල ගබඩා කිරීමේ කාලය.
නිර්දේශය: සාම්පල -80 °C දී ගබඩා කිරීම හෝ ද්‍රව නයිට්‍රජන් වල කැටි කිරීම සහ නැවත නැවත කැටි කිරීම දියවන භාවිතය වැළැක්වීම;RNA නිස්සාරණය සඳහා නැවුම් පටක හෝ සංස්කෘතික සෛල භාවිතා කිරීමට උත්සාහ කරන්න.
3. ප්‍රමාණවත් නොවන නියැදි ලිසිස්.
නිර්දේශය: පටක සමජාතීය කරන විට, පටක ප්‍රමාණවත් ලෙස සමජාතීය වී ඇති බවත්, RNA මුදා හැරීම පැහැදිලි කිරීම සඳහා පටක සෛල ප්‍රමාණවත් ලෙස බෙදී ඇති බවත් සහතික කරන්න.
4. එලියුන්ට් නිවැරදිව එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: RNase-Free ddH බව තහවුරු කරන්න2O පිරිසිදු කිරීමේ තීරු පටලයේ මැදට පහතට එකතු වේ.
5. නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව Buffer RL2 හෝ Buffer RW2 වෙත එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: උපදෙස් අනුගමනය කරන්න, බෆර් RL2 සහ Buffer RW2 වෙත නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කර කට්ටලය භාවිතා කිරීමට පෙර හොඳින් මිශ්ර කරන්න.
6. පටක සාම්පල මාත්‍රාව සුදුසු නොවේ.
නිර්දේශය: පටක 10-20 mg හෝ (1-5) × 10 භාවිතා කරන්න6500 μl බෆරයකට සෛල RL1, අධික පටක භාවිතය නිසා RNA නිස්සාරණය අඩු විය හැක.
7. නුසුදුසු elution පරිමාව හෝ අසම්පූර්ණ elution.
නිර්දේශය: පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ ඉලියුෂන් පරිමාව 50-200 μl;ඉවත් කිරීමේ බලපෑම සතුටුදායක නොවේ නම්, පෙර රත් කළ RNase-Free ddH එකතු කිරීමෙන් පසු කාමර උෂ්ණත්වයේ තැබීමේ කාලය දීර්ඝ කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.2O, උදා: 5-10 විනාඩි සඳහා.
8.Buffer RW2 සේදීමෙන් පසු පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ එතනෝල් අවශේෂ ඇත.
නිර්දේශය: Buffer RW2 සේදීමෙන් පසුව එතනෝල් අවශේෂ තිබේ නම්, විනාඩි 1 ක් සඳහා හිස් නල කේන්ද්‍රපසාරී කිරීම, හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී මෙහෙයුම සඳහා කාලය මිනිත්තු 2 දක්වා වැඩි කළ හැකිය, නැතහොත් ඉතිරි එතනෝල් ප්‍රමාණවත් ලෙස ඉවත් කිරීම සඳහා පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව කාමර උෂ්ණත්වයේ විනාඩි 5 ක් තැබිය හැකිය.
පිරිසිදු RNA ක්ෂය වේ
පිරිසිදු කරන ලද RNA වල ගුණාත්මක භාවය සාම්පල සංරක්ෂණය, RNase දූෂණය සහ හැසිරවීම වැනි සාධකවලට සම්බන්ධ වේ.
1. පටක සාම්පල නියමිත වේලාවට තබා නොමැත.
නිර්දේශය: පටක සාම්පල හෝ සෛල එකතු කිරීමෙන් පසු කාලෝචිත ආකාරයකින් භාවිතා නොකළහොත්, වහාම -80 ° C හෝ දියර නයිට්‍රජන් හි ක්‍රියෝප්‍රසර්ව් කරන්න.RNA නිස්සාරණය කිරීම සඳහා, හැකි සෑම විටම අලුතින් ගත් පටක හෝ සෛල සාම්පලයක් භාවිතා කරන්න.
2. පටක සාම්පල නැවත නැවත කැටි කිරීම.
නිර්දේශය: පටක සාම්පල ගබඩා කිරීමේදී, ඒවා සංරක්ෂණය සඳහා කුඩා කැබලිවලට කපා ගැනීම වඩාත් සුදුසු වන අතර, නියැදිය නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ RNA ක්ෂය වීම වැළැක්වීම සඳහා ඒවා භාවිතා කරන විට එක් කැබැල්ලක් ඉවත් කරන්න.
3. මෙහෙයුම අතරතුර RNase හඳුන්වා දෙනු ලැබේ හෝ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම්, වෙස් මුහුණු ආදිය පැළඳ නැත.
නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණ අත්හදා බැලීම් වඩාත් හොඳින් සිදු කරනු ලබන්නේ වෙනම RNA හැසිරවීමේ කාමරවල වන අතර පරීක්ෂණයට පෙර මේසය ඉවත් කරනු ලැබේ.
RNase හඳුන්වාදීම නිසා ඇතිවන RNA හායනය අවම කිරීම සඳහා අත්හදා බැලීමේදී ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් සහ මුහුණු ආවරණ පළඳින්න.
4. ප්රතික්රියාකාරක භාවිතා කිරීමේදී RNase සමඟ දූෂිත වේ.
නිර්දේශය: අදාළ පරීක්ෂණ සඳහා නව සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලයක් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
5. RNA හැසිරවීමේදී භාවිතා කරන කේන්ද්රාපසාරී නල, ඉඟි ආදිය RNase වලින් දූෂිත වේ.
නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණයේදී භාවිතා කරන කේන්ද්රාපසාරී නල, ඉඟි, පයිප්ප ආදිය සියල්ල RNase-නිදහස් බව තහවුරු කරන්න.
පිරිපහදු කළ RNA පහළ ප්‍රවාහයේ පරීක්ෂණවලට බලපායි
පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව මගින් පිරිසිදු කරන ලද RNA, ලවණ අයන, ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය ඉතා විශාල නම්, ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම, උතුරු බ්ලොට් et al වැනි පහළ ප්‍රවාහයේ පර්යේෂණයට බලපානු ඇත.
1. ඉවත් කරන ලද RNA වල ලුණු අයන අවශේෂ ඇත.
නිර්දේශය: Buffer RW2 වෙත එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කර ඇති බව තහවුරු කර ක්‍රියාත්මක කිරීම සඳහා දක්වා ඇති කේන්ද්රාපසාරී වේගයේ දී පිරිසිදු කිරීමේ තීරු වොෂ් 2 ක් සිදු කරන්න;ලුණු අයන අපද්‍රව්‍ය තිබේ නම්, පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව Buffer RW2 වෙත කාමර උෂ්ණත්වයේ දී විනාඩි 5ක් තබා ලුණු දූෂණය ඉවත් කිරීම උපරිම කිරීම සඳහා කේන්ද්රාපසාරී කිරීම සිදු කරන්න.
2. ඉවත් කරන ලද RNA හි එතනෝල් අවශේෂ.
නිර්දේශය: බෆරය RW2 සේදීමෙන් පසු, ක්‍රියාත්මක කිරීම සඳහා දක්වා ඇති කේන්ද්රාපසාරී වේගයේ හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී මෙහෙයුම සිදු කරන බව තහවුරු කරන්න, එතනෝල් අපද්‍රව්‍ය තිබේ නම් හිස් නල කේන්ද්රාපසාරී මෙහෙයුමේ කාලය විනාඩි 2 දක්වා වැඩි කරන්න, නැතහොත් හිස් නළයෙන් විනාඩි 5 ක් කාමර උෂ්ණත්වයේ තබන්න.
