සෛල මුළු RNA හුදකලා කට්ටලය සෛලයෙන් මුළු RNA හුදකලා පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල
කට්ටල විස්තරය:
මිනිත්තු 11 කින් විවිධ සංස්කෘතික සෛල වලින් ඉතා පිරිසිදු හා උසස් තත්ත්වයේ සම්පූර්ණ RNA ලබා ගත හැක.
RNase-නිදහස්
කාමර උෂ්ණත්වයේ ක්‍රියා කරයි (15-25℃)
DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව සමඟ
ඉහළ RNA අස්වැන්නක්
වේගවත්: මිනිත්තු 11 කින් නිස්සාරණය අවසන් කරන්න
ආරක්ෂාව: කාබනික රසායනික කිසිවක් නැත
විස්තර
මෙම කට්ටලය 96, 24, 12, සහ 6-ළිං තහඩු තුළ වගා කරන ලද සෛල වලින් ඉහළ සංශුද්ධතාවය සහ උසස් තත්ත්වයේ සම්පූර්ණ RNA කාර්යක්ෂමව ලබා ගත හැකි Foregene විසින් සංවර්ධනය කරන ලද භ්‍රමණය තීරුව සහ සූත්‍රය භාවිතා කරයි.
කට්ටලය කාර්යක්ෂම DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවක් සපයයි, එමඟින් අධි ප්‍රවාහක සහ සෛල ලයිසේට් පහසුවෙන් වෙන් කිරීමට, ප්‍රවේණික DNA බැඳීමට සහ ඉවත් කිරීමට හැකිය.මෙහෙයුම සරල හා කාලය ඉතිරි කරයි.
Tඔහු RNA-පමණක් තීරුවට RNA කාර්යක්ෂමව අද්විතීය සූත්‍රයකින් බැඳිය හැක.සාම්පල විශාල සංඛ්යාවක් එකවර සකස් කළ හැක.
කට්ටල සංරචක
| කට්ටල සංයුතිය | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 ටී | ටී 200 | |
| බෆරය cRL1* | 25 මිලි | මිලි ලීටර් 100 යි |
| බෆරය cRL2 | 15 මිලි | 60 මිලි |
| බෆරය RW1* | 25 මිලි | මිලි ලීටර් 100 යි |
| බෆරය RW2 | 24 මිලි | 96 මිලි |
| RNase-නිදහස් ddH2O | 10 මිලි | 40 මිලි |
| RNA-පමණක් තීරුව | 50 | 200 |
| DNA පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව | 50 | 200 |
| උපදෙස් | 1 | 1 |
*බෆර් cRL1 සහ Buffer RW1 හි කුපිත කරවන ව්‍යාකූල ලවණ අඩංගු බැවින් කරුණාකර අත්වැසුම් පැළඳගෙන ක්‍රියාන්විතයේදී ආරක්ෂිත පියවර ගන්න.
විශේෂාංග සහ වාසි
■ සම්පූර්ණ ක්‍රියාවලිය කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25℃), අයිස් ස්නානයකින් සහ අඩු උෂ්ණත්ව කේන්ද්‍රාපසාරීයකින් තොරව ක්රියාත්මක වේ.
■ සම්පූර්ණ කට්ටලයම RNase-නිදහස් වේ, RNA ක්ෂය වීම ගැන කරදර විය යුතු නැත.
■ DNA-පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව විශේෂයෙන් DNA බන්ධනය කරයි, එවිට කට්ටලයට අමතර DNase එකතු නොකර ජානමය DNA දූෂණය ඉවත් කළ හැකිය.
■ ඉහළ RNA අස්වැන්න: RNA-පමණක් තීරුව සහ අද්විතීය සූත්‍රයට RNA කාර්යක්ෂමව පිරිසිදු කළ හැක.
■ වේගවත් වේගය: ක්රියාත්මක කිරීමට පහසු සහ විනාඩි 11 කින් සම්පූර්ණ කළ හැක.
■ ආරක්ෂාව: කාබනික ප්රතික්රියාකාරක අවශ්ය නොවේ.
■ උසස් තත්ත්වයේ: පිරිසිදු කරන ලද RNA ඉහළ සංශුද්ධතාවයකින් යුක්ත වන අතර, ප්‍රෝටීන් සහ අනෙකුත් අපද්‍රව්‍ය වලින් තොර වන අතර, පසුව විවිධ අත්හදා බැලීම් වලට මුහුණ දිය හැක.
කට්ටල යෙදුම
එය 96, 24, 12, සහ 6-ළිං තහඩු වල සංස්කෘතික සෛල වලින් සම්පූර්ණ RNA නිස්සාරණය සහ පිරිසිදු කිරීම සඳහා සුදුසු වේ.
වැඩ ප්රවාහය
රූප සටහන
Cell Total RNA Isolation Kit හි ඇගරෝස් ජෙල් බැටරි රූප සටහන ඉහත විවිධ සෛල සංඛ්‍යාව, 20μl පරිමාව ඉවත් කිරීම, 2μl පිරිපහදු කළ මුළු RNA 1% ලබා ගනී.
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීමේ කාලය
කට්ටලය කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ℃) හෝ 2-8 ℃ වැඩි කාලයක් (මාස 24) මාස 12 ක් ගබඩා කළ හැක.
බෆර් cRL1 2-hydroxy-1-ethanethiol (විකල්ප) එකතු කිරීමෙන් පසු මාස 1 ක් සඳහා 4 ℃ ගබඩා කළ හැක.
RNA නිස්සාරණය නොකෙරේ හෝ RNA අස්වැන්න අඩු වේ
බොහෝ විට ප්‍රතිසාධන කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන විවිධ සාධක ඇත, එනම්: පටක සාම්පල RNA අන්තර්ගතය, ක්‍රියා කරන ක්‍රමය, ඉවත් කිරීමේ පරිමාව යනාදිය.
1. මෙහෙයුම අතරතුර අයිස් ස්නානය හෝ ක්‍රයොජනික් (4 °C) කේන්ද්‍රාපසාරී කිරීම සිදු කරන ලදී.
නිර්දේශය: සම්පූර්ණ ක්‍රියාවලිය පුරාම කාමර උෂ්ණත්වයේ (15-25 ° C) ක්‍රියා කරන්න, අඩු උෂ්ණත්වවලදී අයිස් ස්නානය සහ කේන්ද්‍රාපසාරී නොකරන්න.
2. නුසුදුසු නියැදි සංරක්ෂණය හෝ අධික සාම්පල ගබඩා කිරීමේ කාලය.
නිර්දේශය: සාම්පල -80 °C දී ගබඩා කිරීම හෝ ද්‍රව නයිට්‍රජන් වල කැටි කිරීම සහ නැවත නැවත කැටි කිරීම දියවන භාවිතය වැළැක්වීම;RNA නිස්සාරණය සඳහා නැවුම් පටක හෝ සංස්කෘතික සෛල භාවිතා කිරීමට උත්සාහ කරන්න.
3. ප්‍රමාණවත් නොවන නියැදි ලිසිස්.
නිර්දේශය: පටක සමජාතීය කරන විට, පටක ප්‍රමාණවත් ලෙස සමජාතීය වී ඇති බවත්, RNA මුදා හැරීම පැහැදිලි කිරීම සඳහා පටක සෛල ප්‍රමාණවත් ලෙස බෙදී ඇති බවත් සහතික කරන්න.
4. එලියුන්ට් නිවැරදිව එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: RNase-Free ddH බව තහවුරු කරන්න2O පිරිසිදු කිරීමේ තීරු පටලයේ මැදට පහතට එකතු වේ.
5. නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව Buffer RL2 හෝ Buffer RW2 වෙත එකතු කර නැත.
නිර්දේශය: උපදෙස් අනුගමනය කරන්න, බෆර් RL2 සහ Buffer RW2 වෙත නිරපේක්ෂ එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කර කට්ටලය භාවිතා කිරීමට පෙර හොඳින් මිශ්ර කරන්න.
6. පටක සාම්පල මාත්‍රාව සුදුසු නොවේ.
නිර්දේශය: පටක 10-20 mg හෝ (1-5) × 10 භාවිතා කරන්න6500 μl බෆරයකට සෛල RL1, අධික පටක භාවිතය නිසා RNA නිස්සාරණය අඩු විය හැක.
7. නුසුදුසු elution පරිමාව හෝ අසම්පූර්ණ elution.
නිර්දේශය: පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ ඉලියුෂන් පරිමාව 50-200 μl;ඉවත් කිරීමේ බලපෑම සතුටුදායක නොවේ නම්, පෙර රත් කළ RNase-Free ddH එකතු කිරීමෙන් පසු කාමර උෂ්ණත්වයේ තැබීමේ කාලය දීර්ඝ කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.2O, උදා: 5-10 විනාඩි සඳහා.
8.Buffer RW2 සේදීමෙන් පසු පිරිසිදු කිරීමේ තීරුවේ එතනෝල් අවශේෂ ඇත.
නිර්දේශය: Buffer RW2 සේදීමෙන් පසුව එතනෝල් අවශේෂ තිබේ නම්, විනාඩි 1 ක් සඳහා හිස් නල කේන්ද්‍රපසාරී කිරීම, හිස් නල කේන්ද්‍රාපසාරී මෙහෙයුම සඳහා කාලය මිනිත්තු 2 දක්වා වැඩි කළ හැකිය, නැතහොත් ඉතිරි එතනෝල් ප්‍රමාණවත් ලෙස ඉවත් කිරීම සඳහා පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව කාමර උෂ්ණත්වයේ විනාඩි 5 ක් තැබිය හැකිය.
පිරිසිදු RNA ක්ෂය වේ
පිරිසිදු කරන ලද RNA වල ගුණාත්මක භාවය සාම්පල සංරක්ෂණය, RNase දූෂණය සහ හැසිරවීම වැනි සාධකවලට සම්බන්ධ වේ.
1. පටක සාම්පල නියමිත වේලාවට තබා නොමැත.
නිර්දේශය: පටක සාම්පල හෝ සෛල එකතු කිරීමෙන් පසු කාලෝචිත ආකාරයකින් භාවිතා නොකළහොත්, වහාම -80 ° C හෝ දියර නයිට්‍රජන් හි ක්‍රියෝප්‍රසර්ව් කරන්න.RNA නිස්සාරණය කිරීම සඳහා, හැකි සෑම විටම අලුතින් ගත් පටක හෝ සෛල සාම්පලයක් භාවිතා කරන්න.
2. පටක සාම්පල නැවත නැවත කැටි කිරීම.
නිර්දේශය: පටක සාම්පල ගබඩා කිරීමේදී, ඒවා සංරක්ෂණය සඳහා කුඩා කැබලිවලට කපා ගැනීම වඩාත් සුදුසු වන අතර, නියැදිය නැවත නැවත කැටි කිරීම සහ RNA ක්ෂය වීම වැළැක්වීම සඳහා ඒවා භාවිතා කරන විට එක් කැබැල්ලක් ඉවත් කරන්න.
3. මෙහෙයුම අතරතුර RNase හඳුන්වා දෙනු ලැබේ හෝ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම්, වෙස් මුහුණු ආදිය පැළඳ නැත.
නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණ අත්හදා බැලීම් වඩාත් හොඳින් සිදු කරනු ලබන්නේ වෙනම RNA හැසිරවීමේ කාමරවල වන අතර පරීක්ෂණයට පෙර මේසය ඉවත් කරනු ලැබේ.
RNase හඳුන්වාදීම නිසා ඇතිවන RNA හායනය අවම කිරීම සඳහා අත්හදා බැලීමේදී ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් සහ මුහුණු ආවරණ පළඳින්න.
4. ප්රතික්රියාකාරක භාවිතා කිරීමේදී RNase සමඟ දූෂිත වේ.
නිර්දේශය: අදාළ පරීක්ෂණ සඳහා නව සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලයක් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
5. RNA හැසිරවීමේදී භාවිතා කරන කේන්ද්‍රාපසාරී නල, ඉඟි ආදිය RNase වලින් දූෂිත වේ.
නිර්දේශය: RNA නිස්සාරණයේදී භාවිතා කරන කේන්ද්‍රාපසාරී නල, ඉඟි, පයිප්ප ආදිය සියල්ල RNase-නිදහස් බව තහවුරු කරන්න.
පිරිපහදු කළ RNA පහළ ප්‍රවාහයේ පරීක්ෂණවලට බලපායි
පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව මගින් පිරිසිදු කරන ලද RNA, ලවණ අයන, ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය ඉතා විශාල නම්, ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම, උතුරු බ්ලොට් et al වැනි පහළ ප්‍රවාහයේ පර්යේෂණයට බලපානු ඇත.
1. ඉවත් කරන ලද RNA වල ලුණු අයන අවශේෂ ඇත.
නිර්දේශය: Buffer RW2 වෙත එතනෝල් වල නිවැරදි පරිමාව එකතු කර ඇති බව තහවුරු කර ක්රියාත්මක කිරීම සඳහා දක්වා ඇති කේන්ද්‍රාපසාරී වේගයේ දී පිරිසිදු කිරීමේ තීරු වොෂ් 2 ක් සිදු කරන්න;ලුණු අයන අපද්‍රව්‍ය තිබේ නම්, පිරිසිදු කිරීමේ තීරුව Buffer RW2 වෙත කාමර උෂ්ණත්වයේ දී විනාඩි 5ක් තබා ලුණු දූෂණය ඉවත් කිරීම උපරිම කිරීම සඳහා කේන්ද්‍රාපසාරී කිරීම සිදු කරන්න.
2. ඉවත් කරන ලද RNA හි එතනෝල් අවශේෂ.
නිර්දේශය: බෆරය RW2 සේදීමෙන් පසුව, ක්රියාත්මක කිරීම සඳහා දක්වා ඇති කේන්ද්‍රාපසාරී වේගයේ හිස් නල කේන්ද්‍රාපසාරී මෙහෙයුම සිදු කරන බව තහවුරු කරන්න, එතනෝල් අපද්‍රව්‍ය තවමත් පවතී නම්, හිස් නල කේන්ද්‍රාපසාරී මෙහෙයුමේ කාලය මිනිත්තු 2 දක්වා වැඩි කරන්න, නැතහොත් කාමර උෂ්ණත්වයේ දී මීටර් 5 ක් තබන්න.
