පවිත්ර නොකළ නියැදි තත්ය කාලීන ප්රමාණාත්මක PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U සඳහා 2× සාන්ද්රිත ප්රිමික්ස් සඳහා චීන නිෂ්පාදකයා
සංවිධානය "විද්යාත්මක කළමනාකරණය, ඉහළ ගුණාත්මක භාවය සහ කාර්යක්ෂමතා ප්රමුඛත්වය, 2× චීනයේ නිෂ්පාදකයා සඳහා ගැනුම්කරු උත්තරීතර, 2× සාන්ද්රිත ප්රිමික්ස් සඳහා පවිත්ර නොකළ නියැදි තත්ය කාලීන ප්රමාණාත්මක PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U යන ක්රියා පටිපාටි සංකල්පය මත තබා ගනී. අපගේ ව්යාපාරය සෑම පාරිභෝගිකයෙකුටම සැලකිය යුතු සහ ඉහළ ගුණාත්මක නිෂ්පාදන ලබා දීම සඳහා කැපවී සිටී.
සංවිධානය "විද්යාත්මක කළමනාකරණය, උසස් තත්ත්වයේ සහ කාර්යක්ෂමතා ප්රමුඛත්වය, ගැනුම්කරු උත්තරීතර" යන ක්රියා පටිපාටි සංකල්පය මත තබා ගනී.China Taq DNA පොලිමරේස් සහ Qpcr, අපගේ සමාගමට බහුල ශක්තියක් ඇති අතර ස්ථාවර සහ පරිපූර්ණ විකුණුම් ජාල පද්ධතියක් ඇත.අන්යෝන්ය ප්රතිලාභ මත දෙස් හා විදේශයන්හි සිටින සියලුම ගනුදෙනුකරුවන් සමඟ හොඳ ව්යාපාරික සබඳතා ඇති කර ගැනීමට අපට හැකි වනු ඇතැයි අපි ප්රාර්ථනා කරමු.
රියල් ටයිම් PCR ප්රයිමර් සැලසුම් මූලධර්ම
Forward Primer සහ Reverse Primer
රියල් ටයිම් PCR සඳහා, ප්රාථමික නිර්මාණය ඉතා වැදගත් වේ.ප්රයිමර් PCR විස්තාරණයේ විශේෂත්වය සහ කාර්යක්ෂමතාවයට සම්බන්ධ වන අතර පහත සඳහන් මූලධර්මවලට අදාළව නිර්මාණය කළ හැක:
- ප්රාථමික දිග: 18-30bp.
- GC අන්තර්ගතය: 40-60%.
- Tm අගය: Primer 5 වැනි ප්රයිමර් නිර්මාණ මෘදුකාංග, ප්රාථමිකයේ Tm අගය ලබා දිය හැක.ඉහළ සහ පහළ ප්රාථමික වල Tm අගයන් හැකි තරම් සමීප විය යුතුය.Tm ගණනය කිරීමේ සූත්රය ද භාවිතා කළ හැක: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR සිදු කරන විට, ප්රාථමික Tm අගය 5 °C ට වඩා අඩු උෂ්ණත්වයක් සාමාන්යයෙන් annealing උෂ්ණත්වය ලෙස තෝරා ගනු ලැබේ (නිවාරණ උෂ්ණත්වයේ අනුරූප වැඩි වීම PCR ප්රතික්රියාවේ විශේෂත්වය වැඩි කළ හැක).
- ප්රයිමර් සහ PCR නිෂ්පාදන:
- සැලසුම් ප්රයිමර් PCR විස්තාරණ නිෂ්පාදන දිග වඩාත් සුදුසු වන්නේ 100-150bp වේ.
- සැකිල්ලේ ද්විතියික ව්යුහාත්මක ප්රදේශයේ සැලසුම් ප්රයිමර් හැකිතාක් දුරට වැළැක්විය යුතුය.
- ඉහළ සහ පහළ ප්රයිමර් වල 3′ අන්ත අතර අනුපූරක පාද 2ක් හෝ වැඩි ගණනක් සෑදීමෙන් වළකින්න.
- ප්රයිමර් 3′ පර්යන්ත පාදය අතිරේක අනුගාමී G හෝ C 3ක් සමඟ පැවතිය නොහැක.
- ප්රයිමර් වලට අනුපූරක ව්යුහයන් තිබිය නොහැක, එසේ නොමැතිනම් හිසකෙස් ව්යුහයක් සාදනු ඇත, එය PCR විස්තාරණයට බලපායි.
- ATCG ප්රාථමික අනුපිළිවෙලෙහි හැකිතාක් ඒකාකාරව බෙදා හැරිය යුතු අතර, 3′ පර්යන්ත පදනම T ලෙස වැළැක්විය යුතුය.
උපග්රන්ථය1: සීell සෘජුRT-qPCR කට්ටලයt අතිරේක ඇසුරුම
1.සෛල ලිසිස් විසඳුම
සෛල ලයිසිස් විසඳුම | |||
කට්ටල සංරචක (24-ළිං ලයිසිස් පද්ධතිය / ළිඳ) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
ටී 100 | ටී 500 | ||
කොටසමම | බෆර් CL | 20 මිලි | මිලි ලීටර් 100 යි |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
බෆර් ST | 1 ml × 2 | 10 මිලි | |
කොටසII | DNA මකනය | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT මිශ්රණය | |
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01011-B1 |
ටී 200 | |
5× සෘජු RT මිශ්රණය | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
qPCR මිශ්රණය | ||
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
ටී 200 | ටී 1000 | |
2× සෘජු qPCR මික්ස්-ටක්මන් | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX යොමු ඩයි | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 මිලි | 10 මිලි |
සංවිධානය "විද්යාත්මක කළමනාකරණය, ඉහළ ගුණාත්මක භාවය සහ කාර්යක්ෂමතා ප්රමුඛත්වය, 2× චීනයේ නිෂ්පාදකයා සඳහා ගැනුම්කරු උත්තරීතර, 2× සාන්ද්රිත ප්රිමික්ස් සඳහා පවිත්ර නොකළ නියැදි තත්ය කාලීන ප්රමාණාත්මක PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U යන ක්රියා පටිපාටි සංකල්පය මත තබා ගනී. අපගේ ව්යාපාරය සෑම පාරිභෝගිකයෙකුටම සැලකිය යුතු සහ ඉහළ ගුණාත්මක නිෂ්පාදන ලබා දීම සඳහා කැපවී සිටී.
සඳහා චීන නිෂ්පාදකයාChina Taq DNA පොලිමරේස් සහ Qpcr, අපගේ සමාගමට බහුල ශක්තියක් ඇති අතර ස්ථාවර සහ පරිපූර්ණ විකුණුම් ජාල පද්ධතියක් ඇත.අන්යෝන්ය ප්රතිලාභ මත දෙස් හා විදේශයන්හි සිටින සියලුම ගනුදෙනුකරුවන් සමඟ හොඳ ව්යාපාරික සබඳතා ඇති කර ගැනීමට අපට හැකි වනු ඇතැයි අපි ප්රාර්ථනා කරමු.
රියල් ටයිම් PCR ප්රයිමර් සැලසුම් මූලධර්ම
Forward Primer සහ Reverse Primer
රියල් ටයිම් PCR සඳහා, ප්රාථමික නිර්මාණය ඉතා වැදගත් වේ.ප්රයිමර් PCR විස්තාරණයේ විශේෂත්වය සහ කාර්යක්ෂමතාවයට සම්බන්ධ වන අතර පහත සඳහන් මූලධර්මවලට අදාළව නිර්මාණය කළ හැක:
- ප්රාථමික දිග: 18-30bp.
- GC අන්තර්ගතය: 40-60%.
- Tm අගය: Primer 5 වැනි ප්රයිමර් නිර්මාණ මෘදුකාංග, ප්රාථමිකයේ Tm අගය ලබා දිය හැක.ඉහළ සහ පහළ ප්රාථමික වල Tm අගයන් හැකි තරම් සමීප විය යුතුය.Tm ගණනය කිරීමේ සූත්රය ද භාවිතා කළ හැක: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR සිදු කරන විට, ප්රාථමික Tm අගය 5 °C ට වඩා අඩු උෂ්ණත්වයක් සාමාන්යයෙන් annealing උෂ්ණත්වය ලෙස තෝරා ගනු ලැබේ (නිවාරණ උෂ්ණත්වයේ අනුරූප වැඩි වීම PCR ප්රතික්රියාවේ විශේෂත්වය වැඩි කළ හැක).
- ප්රයිමර් සහ PCR නිෂ්පාදන:
- සැලසුම් ප්රයිමර් PCR විස්තාරණ නිෂ්පාදන දිග වඩාත් සුදුසු වන්නේ 100-150bp වේ.
- සැකිල්ලේ ද්විතියික ව්යුහාත්මක ප්රදේශයේ සැලසුම් ප්රයිමර් හැකිතාක් දුරට වැළැක්විය යුතුය.
- ඉහළ සහ පහළ ප්රයිමර් වල 3′ අන්ත අතර අනුපූරක පාද 2ක් හෝ වැඩි ගණනක් සෑදීමෙන් වළකින්න.
- ප්රයිමර් 3′ පර්යන්ත පාදය අතිරේක අනුගාමී G හෝ C 3ක් සමඟ පැවතිය නොහැක.
- ප්රයිමර් වලට අනුපූරක ව්යුහයන් තිබිය නොහැක, එසේ නොමැතිනම් හිසකෙස් ව්යුහයක් සාදනු ඇත, එය PCR විස්තාරණයට බලපායි.
- ATCG ප්රාථමික අනුපිළිවෙලෙහි හැකිතාක් ඒකාකාරව බෙදා හැරිය යුතු අතර, 3′ පර්යන්ත පදනම T ලෙස වැළැක්විය යුතුය.
උපග්රන්ථය1: සීell සෘජුRT-qPCR කට්ටලයt අතිරේක ඇසුරුම
1.සෛල ලිසිස් විසඳුම
සෛල ලයිසිස් විසඳුම | |||
කට්ටල සංරචක (24-ළිං ලයිසිස් පද්ධතිය / ළිඳ) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
ටී 100 | ටී 500 | ||
කොටසමම | බෆර් CL | 20 මිලි | මිලි ලීටර් 100 යි |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
බෆර් ST | 1 ml × 2 | 10 මිලි | |
කොටසII | DNA මකනය | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT මිශ්රණය | |
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01011-B1 |
ටී 200 | |
5× සෘජු RT මිශ්රණය | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
qPCR මිශ්රණය | ||
කට්ටල සංරචක (20 μl ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
ටී 200 | ටී 1000 | |
2× සෘජු qPCR මික්ස්-ටක්මන් | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX යොමු ඩයි | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 මිලි | 10 මිලි |
උපදෙස් අත්පොත්: