Foreasy HS Taq DNA පොලිමරේස්
කට්ටල විස්තරය:
◮ඉහළ නිශ්චිතතාව: ඉහළ උණුසුම්-ආරම්භක ක්රියාකාරකම් සහිත එන්සයිමය.
◮වේගවත් විස්තාරණය: තත්පර 10/kb.
◮ඉහළ අච්චු අනුවර්තනය වීමේ හැකියාව : High කාර්යක්ෂමව විස්තාරණය කිරීමට භාවිතා කළ හැකGCඅගයසහවිස්තාරණය කිරීමට අපහසු විවිධ DNA සැකිල්ල.
◮ශක්තිමත් විශ්වාසවන්තභාවය: විශ්වාසවන්තභාවය 6 ගුණයකිof සාමාන්ය Taq එන්සයිමය.
විස්තර
Foreasy HS Taq DNA Polymerase යනු ජාන ප්‍රතිසංයෝජන තාක්ෂණය මගින් Escherichia coli ඉංජිනේරු බැක්ටීරියාව තුළ ප්‍රකාශිත නව Taq එන්සයිමයකි.එන්සයිම විශේෂ ක්රියාවලියක් සමඟ ප්රතිකාර කිරීමෙන් පසුව, එය'තාප සක්රිය කිරීමට පෙර ගේ ක්රියාකාරිත්වය නිෂේධනය වන අතර, එමගින් අඩු උෂ්ණත්ව තත්ත්වයන් යටතේ ප්රාථමික හෝ ප්රාථමික ඩයිමර්වල විශේෂිත නොවන ඇනීම නිසා ඇතිවන විශේෂිත නොවන විස්තාරණය වළක්වයි.මෙම නිෂ්පාදනය ඉතා විශේෂිත PCR ප්රතික්රියා සඳහා සුදුසු වේඅයන, M බහු x PCR, ඉහළ GC අන්තර්ගතය (> 60%),සමගද්විතියික ව්යුහයහෝ වෙනත්ශක්තිමත් පසුබිම් ජෙනෝමයicsවිස්තාරණය සහ මහා පරිමාණ ජෙනෝමයicsවිස්තාරණය හඳුනාගැනීම.එන්සයිමයේ 5' → 3' DNA පොලිමරේස් ක්රියාකාරකම් සහ 5' → 3' exonuclease ක්රියාකාරකම් ඇත, නමුත් 3' → 5' exonuclease ක්රියාකාරකම් නොමැත.
කට්ටල සංරචක
| සංරචකය | IM-01021 | IM-01022 | IM-01023 |
| Foreasy HS Taq DNA පොලිමරේස් (5 U/μL) | 5000 U (මිලි ලීටර් 1) | 50 KU (මිලි ලීටර් 10) | 500 KU (මිලි ලීටර් 100) |
| 2× Taq ප්රතික්රියා බෆරය | මිලි ලීටර් 25 × 5 | මිලි ලීටර් 250 × 5 | මිලි ලීටර් 500 × 25 |
විශේෂාංග සහ වාසි
- ඉහළ නිශ්චිතතාව: ඉහළ උණුසුම්-ආරම්භක ක්රියාකාරකම් සහිත එන්සයිමය.
- වේගවත් විස්තාරණය: තත්පර 10/kb.
- ඉහළ අච්චු අනුවර්තනය වීමේ හැකියාව: ඉහළ කාර්යක්ෂමව විස්තාරණය කිරීමට භාවිතා කළ හැකGCඅගයසහවිස්තාරණය කිරීමට අපහසු විවිධ DNA සැකිල්ල.
- ශක්තිමත් විශ්වාසවන්තභාවය: විශ්වාසවන්තභාවය 6 ගුණයකිof සාමාන්ය Taq එන්සයිමය.
කට්ටල යෙදුම
- විවිධ PCR/qPCR පද්ධතිය සහ සෘජු PCR පද්ධතිය
- PCR වර්ධක DNA කොටස
- DNA ලකුණ
- DNA අනුක්‍රමණය
- PCR ප්ලස් A වලිගය
ක්රියාකාරකම් අර්ථ දැක්වීම
1U: nmol 10 ක් ඇතුළත් කිරීමට අවශ්‍ය එන්සයිම ප්රමාණයDNAසක්රිය සැමන් ශුක්‍රාණු DNA සැකිල්ල / ප්රාථමික ලෙස භාවිතා කරමින් අම්ල-ද්‍රාව්‍ය නොවන ද්‍රව්‍ය බවට, 74 °C, විනාඩි 30.
ප්රතික්රියා තත්ත්වය
| උෂ්ණත්වය | ප්රතික්රියා කාලය | සයිකල් කාලය |
| 37°C | විනාඩි 5 | 1 |
| 94°C | විනාඩි 5 | 1 |
| 94°C | තත්පර 10 | 40 |
| 60°C | තත්පර 10 |
සටහන:10 µL සහ 20 µL පද්ධති සඳහා, තාප චක්‍රය තාප පියනක් නොමැති නම් ඛනිජ තෙල් සමාන පරිමාවක් එක් කරන්න.
PCR ප්රතික්රියා තත්ත්වයන් සැකිලි, ප්‍රයිමර් සහ ඒ හා සමාන ව්‍යුහාත්මක තත්ත්වයන් මත පදනම්ව වෙනස් වේ.නිශ්චිත මෙහෙයුමේදී, සැකිලි වර්ගය, ඉලක්ක ඛණ්ඩයේ ප්රමාණය, වර්ධක ඛණ්ඩනයේ පාදක අනුපිළිවෙල සහ ප්‍රාථමිකයේ GC අන්තර්ගතය සහ දිග වැනි නිශ්චිත කොන්දේසි අනුව, උෂ්ණාධික උෂ්ණත්වය, දිගු කාලය, ආදිය ඇතුළුව ප්‍රශස්ත ප්රතික්රියා තත්ත්වයන් සැලසුම් කිරීම අවශ්‍ය වේ.
ගබඞා
වසර 2ක් සඳහා -20 ± 5 °C හෝ දිගුකාලීන ගබඩා කිරීම සඳහා -80 °C.
විස්තාරණ සංඥා නොමැත
1. කට්ටලයේ ඇති Taq DNA Polymerase නිසි ලෙස ගබඩා නොකිරීම හෝ කට්ටලය කල් ඉකුත්වීම හේතුවෙන් එහි ක්රියාකාරිත්වය නැති වේ.
නිර්දේශය: කට්ටලයේ ගබඩා කොන්දේසි තහවුරු කරන්න;PCR පද්ධතියට Taq DNA Polymerase සුදුසු ප්‍රමාණයක් නැවත එක් කරන්න හෝ අදාළ අත්හදා බැලීම් සඳහා නව Real Time PCR කට්ටලයක් මිලදී ගන්න.
2.DNA සැකිල්ලේ Taq DNA Polymerase නිෂේධක ගොඩක් තියෙනවා.
යෝජනාව: අච්චුව නැවත පිරිපහදු කිරීම හෝ භාවිතා කරන අච්චු ප්රමාණය අඩු කිරීම.
3.Mg2+ සාන්ද්‍රණය සුදුසු නොවේ.
නිර්දේශය: අපි සපයන 2× Real PCR මිශ්‍රණයේ Mg2+ සාන්ද්‍රණය 3.5mM වේ.කෙසේ වෙතත්, සමහර විශේෂ ප්රාථමික සහ සැකිලි සඳහා, Mg2+ සාන්ද්‍රණය වැඩි විය හැක.එබැවින්, Mg2+ සාන්ද්‍රණය ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා ඔබට MgCl2 කෙලින්ම එකතු කළ හැක.ප්‍රශස්තකරණය සඳහා සෑම අවස්ථාවකදීම Mg2+ 0.5mM වැඩි කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.
4.PCR විස්තාරණ කොන්දේසි සුදුසු නොවන අතර ප්රාථමික අනුපිළිවෙල හෝ සාන්ද්‍රණය නුසුදුසුය.
යෝජනාව: ප්රාථමික අනුපිළිවෙලෙහි නිවැරදි බව තහවුරු කර ප්‍රාථමිකය පිරිහී නැත;විස්තාරණ සංඥාව හොඳ නැතිනම්, ඇනීලිං උෂ්ණත්වය අඩු කිරීමට සහ ප්රාථමික සාන්ද්‍රණය සුදුසු පරිදි සකස් කිරීමට උත්සාහ කරන්න.
5. සැකිල්ලේ ප්රමාණය ඉතා කුඩා හෝ වැඩිය.
නිර්දේශය: අච්චු රේඛීයකරණ අනුක්‍රමික තනුක කිරීම සිදු කරන්න, සහ තත්‍ය කාලීන PCR අත්හදා බැලීම සඳහා හොඳම PCR ආචරණය සහිත අච්චු සාන්ද්‍රණය තෝරන්න.
NTC සතුව ඉතා ඉහළ ප්‍රතිදීප්ත අගයක් ඇත
1.මෙහෙයවීමේදී ඇතිවන ප්‍රතික්‍රියාකාරක දූෂණය.
නිර්දේශය: රියල් ටයිම් PCR පරීක්ෂණ සඳහා නව ප්‍රතික්‍රියාකාරක සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
2. PCR ප්රතික්රියා පද්ධතිය සකස් කිරීමේදී අපවිත්‍ර වීම සිදු විය.
නිර්දේශය: ක්‍රියාත්මක වන විට අවශ්‍ය ආරක්ෂිත පියවර ගන්න, එනම්: රබර් කිරි අත්වැසුම් පැළඳීම, පෙරනයක් සහිත පයිප්ප තුඩක් භාවිතා කිරීම යනාදිය.
3. ප්‍රයිමර් ක්ෂය වී ඇති අතර, ප්‍රයිමර් වල ක්ෂය වීම විශේෂිත නොවන විස්තාරණයක් ඇති කරයි.
යෝජනාව: ප්‍රයිමර් දිරාපත් වී ඇත්ද යන්න හඳුනා ගැනීමට SDS-PAGE ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් භාවිතා කරන්න, සහ ඒවා තත්‍ය කාලීන PCR පරීක්ෂණ සඳහා නව ප්‍රයිමර් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
ප්‍රයිමර් ඩිමර් හෝ විශේෂිත නොවන විස්තාරණය
1.Mg2+ සාන්ද්‍රණය සුදුසු නොවේ.
නිර්දේශය: අප සපයන 2× Real PCR EasyTM මිශ්‍රණයේ Mg2+ සාන්ද්‍රණය 3.5 mM වේ.කෙසේ වෙතත්, සමහර විශේෂ ප්රාථමික සහ සැකිලි සඳහා, Mg2+ සාන්ද්‍රණය වැඩි විය හැක.එබැවින්, Mg2+ සාන්ද්‍රණය ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා ඔබට MgCl2 කෙලින්ම එකතු කළ හැක.ප්‍රශස්තකරණය සඳහා සෑම අවස්ථාවකදීම Mg2+ 0.5mM වැඩි කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.
2. PCR ඇනලීං උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුය.
යෝජනාව: සෑම අවස්ථාවකදීම PCR ඇනීලිං උෂ්ණත්වය 1℃ හෝ 2℃ කින් වැඩි කරන්න.
3.PCR නිෂ්පාදනය දිග වැඩියි.
නිර්දේශය: රියල් ටයිම් PCR නිෂ්පාදනයේ දිග 100-150bp අතර විය යුතුය, 500bp නොඉක්මවිය යුතුය.
4. ප්‍රාථමිකයන් පිරිහී ඇති අතර, ප්‍රාථමිකයේ ක්ෂය වීම විශේෂිත විස්තාරණයක පෙනුමට හේතු වේ.
යෝජනාව: ප්‍රයිමර් දිරාපත් වී ඇත්ද යන්න හඳුනා ගැනීමට SDS-PAGE ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරේසිස් භාවිතා කරන්න, සහ ඒවා තත්‍ය කාලීන PCR පරීක්ෂණ සඳහා නව ප්‍රයිමර් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කරන්න.
5. PCR පද්ධතිය නුසුදුසු ය, නැතහොත් පද්ධතිය ඉතා කුඩා ය.
යෝජනාව: PCR ප්රතික්රියා පද්ධතිය ඉතා කුඩා බැවින් හඳුනාගැනීමේ නිරවද්‍යතාවය අඩුවීමට හේතු වේ.Real Time PCR අත්හදා බැලීම නැවත ක්‍රියාත්මක කිරීම සඳහා ප්‍රමාණාත්මක PCR උපකරණය මගින් නිර්දේශිත ප්රතික්රියා පද්ධතිය භාවිතා කිරීම වඩාත් සුදුසුය.
ප්‍රමාණාත්මක අගයන්හි දුර්වල පුනරාවර්තන හැකියාව
1. උපකරණය වැරදි ලෙස ක්‍රියා කරයි.
යෝජනාව: උපකරණයේ එක් එක් PCR සිදුරක් අතර දෝෂ තිබිය හැක, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස උෂ්ණත්ව කළමනාකරණයේදී හෝ හඳුනාගැනීමේදී දුර්වල ප්‍රතිනිෂ්පාදනය වේ.කරුණාකර අදාළ උපකරණයේ උපදෙස් අනුව පරීක්ෂා කරන්න.
2.නියැදි සංශුද්ධතාවය හොඳ නැත.
නිර්දේශය: අපිරිසිදු සාම්පල අත්හදා බැලීමේ දුර්වල ප්‍රතිනිෂ්පාදනයට තුඩු දෙනු ඇත, එයට අච්චුවේ සහ ප්‍රාථමිකයේ සංශුද්ධතාවය ඇතුළත් වේ.අච්චුව නැවත පිරිපහදු කිරීම වඩාත් සුදුසු වන අතර, ප්‍රයිමර් SDS-PAGE මගින් වඩාත් හොඳින් පිරිසිදු කර ඇත.
3.PCR පද්ධතිය සකස් කිරීමේ සහ ගබඩා කිරීමේ කාලය ඉතා දිගු වේ.
යෝජනාව: සූදානම් වූ වහාම PCR අත්හදා බැලීම සඳහා රියල් ටයිම් PCR පද්ධතිය භාවිතා කරන්න, වැඩි වේලාවක් එය පසෙකින් තබන්න එපා.
4.PCR විස්තාරණ කොන්දේසි සුදුසු නොවන අතර ප්රාථමික අනුපිළිවෙල හෝ සාන්ද්‍රණය නුසුදුසුය.
යෝජනාව: ප්රාථමික අනුපිළිවෙලෙහි නිවැරදි බව තහවුරු කර ප්‍රාථමිකය පිරිහී නැත;විස්තාරණ සංඥාව හොඳ නැතිනම්, ඇනීලිං උෂ්ණත්වය අඩු කිරීමට සහ ප්රාථමික සාන්ද්‍රණය සුදුසු පරිදි සකස් කිරීමට උත්සාහ කරන්න.
5. PCR පද්ධතිය නුසුදුසු ය, නැතහොත් පද්ධතිය ඉතා කුඩා ය.
යෝජනාව: PCR ප්රතික්රියා පද්ධතිය ඉතා කුඩා බැවින් හඳුනාගැනීමේ නිරවද්‍යතාවය අඩුවීමට හේතු වේ.Real Time PCR අත්හදා බැලීම නැවත ක්‍රියාත්මක කිරීම සඳහා ප්‍රමාණාත්මක PCR උපකරණය මගින් නිර්දේශිත ප්රතික්රියා පද්ධතිය භාවිතා කිරීම වඩාත් සුදුසුය.
-
සත්ව පටක සෘජු PCR කට්ටලය (නියැදීමකින් තොරව ...
-
සත්ව පටක සෘජු PCR කට්ටලය-UNG (නියැදි නොමැතිව...
-
සත්ව පටක DNA හුදකලා කට්ටලය DNA නිස්සාරණය ...
-
සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලය සම්පූර්ණ RNA උපුටා ගැනීම...
-
සෛල සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය සම්පූර්ණ RNA හුදකලා...
-
General Plasmid Mini Kit General Plasmid DNA Ex...
