A260/A230 හි අඩු අනුපාතය සාමාන්‍යයෙන් 230nm හි උපරිම අවශෝෂණ තරංග ආයාමයක් සහිත අපිරිසිදුකම් නිසා ඇතිවේ.මෙම අපද්‍රව්‍ය මොනවාදැයි බලමු:

• පොදු දූෂක	අවශෝෂණ තරංග ආයාමය	අනුපාත බලපෑම
  ප්රෝටීන්	~230nm සහ 280nm	A හි එකවර අඩු කිරීම260/A 280සහ260/A 280අනුපාත
  Guanidine ලුණු	220-240 nm	A අඩු කරන්න260/A 280අනුපාතය
  ෆීනෝල්	~270nm	-
  ට්රයිසෝල්	~230nm සහ 270nm	A අඩු කරන්න260/A 280අනුපාතය
  EDTA	~230nm	A අඩු කරන්න260/A 280අනුපාතය
  එතනෝල්	230-240 nm	A අඩු කරන්න260/A 280අනුපාතය

 
 
 
පොදු දූෂකවල අවශෝෂණ තරංග ආයාමය සහ ප්‍රතිවිරුද්ධ අගය

Pරොටීන් දූෂණය
ප්‍රෝටීන් දූෂණය න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණ ක්‍රියාවලියේ වඩාත් පොදු දූෂණය ලෙස සැලකිය හැකිය.ඉහළ ජලීය අවධිය සහ පහළ අතර ප්රෝටීන් පවතීකාබනිකඅදියර .දූෂණය A260/A280 සහ A260/A230 අනුපාතය එකවර අඩු කරනු ඇති අතර A260/A230 අනුපාතය A260/A280 අනුපාතයට වඩා පැහැදිලිවම වෙනස් වනු ඇත.
පසු කාලය තුළප්රතිලෝම පිටපත් කිරීමor qPCR ප්රතික්රියා, ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය එන්සයිම ක්‍රියාකාරිත්වය අඩාල කිරීමට හෝ බාධා කිරීමට හැකිය.ප්‍රෝටීන් දූෂණය වීම වැළැක්විය හැකි හොඳම ක්‍රමය වන්නේ අධි ප්‍රවාහය උද්දීපනය කිරීමේදී “වැඩි ප්‍රමාණයට වඩා අඩු, බොහෝ වාර ගණනක් කුඩා ප්‍රමාණයක්” යන මූලධර්මය මතක තබා ගැනීමයි.

2. Guanidinium දූෂණය
හයිඩ්‍රොක්ලෝරයිඩ් (GuHCl) සහ guanidine thiocyanate (GTC) න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය කිරීමේ ක්‍රියාවලියේදී සෛල පටල ඉක්මනින් විනාශ කළ හැකි ප්‍රෝටීන විනාශ කිරීමේ බලපෑමක් ඇති කරයි.GuHCl සහ GTC හි අවශෝෂණ තරංග ආයාමය 220-240 nm අතර වේ.අවශේෂ guanidinium ලුණු A260/A230 අනුපාතය අඩු කරයි.අවශේෂ ගුවානිඩිනියම් ලුණු අනුපාතය අඩු කළද,ප්‍රවාහයේ අත්හදා බැලීම් කෙරෙහි ඇති බලපෑම ඇත්ත වශයෙන්ම නොසැලකිය හැකිය.

3. ට්රයිසෝල් දූෂණය
ට්රයිසෝල් හි ප්රධාන සංරචක වන්නේ ෆීනෝල් ​​ය.ෆීනෝල්හි ප්‍රධාන කාර්යය වන්නේ සෛල ලයිස් කිරීම සහ සෛල තුළ ප්‍රෝටීන සහ න්‍යෂ්ටික අම්ල ද්‍රව්‍ය මුදා හැරීමයි.ෆීනෝල් ​​වලට ප්‍රෝටීන් ප්‍රතික්‍ෂේප කළ හැකි වුවද, එයට RNase ක්‍රියාකාරිත්වය සම්පූර්ණයෙන්ම වැළැක්විය නොහැක.එබැවින් 8 -hydroxyquinoline , guanidine isothiocyanate , β- mercaptoethanol යනාදිය අන්තරාසර්ග සහ බාහිර RNase වලක්වාලීම සඳහා TRIzol වෙත එකතු කරනු ලැබේ.
සෛලීය ආර්එන්ඒ නිස්සාරණය කිරීමේදී, ට්‍රයිසෝල්ට සෛල වේගයෙන් ලයිස් කළ හැකි අතර සෛලවලින් මුදා හරින න්‍යෂ්ටිය වළක්වයි, ඉතිරි ට්‍රයිසෝල් A260/A230 අනුපාතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරයි.
සැකසුම් ක්‍රමය: කේන්ද්‍රාපසාරී කරන විට, ට්‍රයිසෝල් හි ෆීනෝල් ​​4 ° සහ කාමර උෂ්ණත්වයේ තත්ත්වය යටතේ ජල අවධියේදී පහසුවෙන් ද්‍රාව්‍ය වන බව සැලකිල්ලට ගත යුතුය.

4. එතනෝල් අවශේෂ
DNA වලට බන්ධනය විය හැකි ලවණ අයන දියකරමින් DNA අවක්ෂේප කිරීමට එතනෝල් අවසාන ක්‍රියාවලියේදී භාවිතා වේ.ඉහළම අවශෝෂණ තරංග ආයාමයඅවශෝෂණයේ උච්චතම අවස්ථාවඑතනෝල් ද 230-240 nm වේA260/A230 අනුපාතය ද අඩු කරනු ඇත.
එතනෝල් අපද්‍රව්‍ය වළක්වා ගැනීමේ ක්‍රමය අවසාන ඉවත් කිරීමේදී දෙවරක් පුනරාවර්තනය කළ හැකිය.දුම් ආවරණයක්ඉවත් කිරීම සඳහා බෆරය එකතු කිරීමට පෙර එතනෝල් සම්පූර්ණයෙන්ම වාෂ්ප වීමට මිනිත්තු දෙකක්.
කෙසේ වෙතත්, අනුපාතය RNA ගුණාත්මක භාවය පිළිබඳ ඇගයීම් දර්ශකයක් පමණක් බව දැනගත යුතුය.ඉහත සඳහන් කරන ලද මෙහෙයුම් දැඩි ලෙස නියාමනය කර ඇත්නම්, අනුපාතය සහ සම්මත පරාසය අතර අපගමනය පහළ පරීක්ෂණ සඳහා විශාල බලපෑමක් ඇති නොකරයි.
ආශ්රිත නිෂ්පාදන:
සත්ව මුළු RNA හුදකලා කට්ටලය
ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය
සෛල සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය
ශාක සම්පූර්ණ RNA හුදකලා කට්ටලය ප්ලස්