සෘජු RT-qPCR කට්ටලය
කට්ටල විස්තරය:
◮ Direct RT-qPCR Kit, Foreasy Reverse Transcriptase සහ Foreasy HS Taq DNA Polymerase මගින් සංවර්ධනය කරන ලද, අද්විතීය ප්රතික්රියා බෆරයක් සමඟින්, මෙම කට්ටලය ශක්තිමත් ප්‍රතිරෝධයක් සහ ගැළපීමක් ඇති කරයි, සහ එයට ප්රතික්රියා භාවිතා කරන Foregene Lysis පද්ධතිය අච්චුවක් ලෙස සෘජුවම පරීක්ෂා කළ හැකිය.මෙම කට්ටලය COVID-19 න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ කට්ටලය සහ අනෙකුත් ව්යාධිජනක බැක්ටීරියා න්යෂ්ටික අම්ල හඳුනාගැනීමේ කට්ටලය සංවර්ධනය සඳහා යෙදිය හැක.
විස්තර
සෘජු RT-qPCR කට්ටලය වෙනම ඇසුරුම් කළ RT-qPCR බෆරයක් සහ ඉහළ කාර්යක්ෂම එන්සයිමයක් සපයයි.මිශ්රණය (Taq,M-MLV,RI), පසුපස අන්ත කට්ටල සහ පද්ධතිය නිර්මාණය කිරීම සඳහා එය පහසු කරයිගැලපීම, සරල සත්‍යාපනයක් තුළ.
පිරිවිතර
500T, 50,000T
කට්ටල සංරචක
| කට්ටලයේ අන්තර්ගතය (20 μL ප්රතික්රියා පද්ධතිය) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| ටී 500 | 50,000 ටී | |
| සෘජු එන්සයිම මිශ්රණය | 500 μL× 1 | 50 මිලි× 1 |
| 2× සෘජු RT-qPCR බෆරය | 1 මිලි× 5 | මිලි ලීටර් 500 යි× 1 |
| උපදෙස් | 1 | 1 |
මෙහෙයුම් පියවර
ප්‍රතික්‍රියාකාරක සකස් කිරීමට පෙර, කට්ටලයේ ඇති සියලුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක කාමර උෂ්ණත්වයේ දී දිය වී මෘදු ලෙස මිශ්‍ර කළ යුතුය.
A: සූදානම් කරන්න of සැකිල්ල සහ ප්රතික්රියාකාරකය
1. සකස් කරන ලද RNA අච්චුව (RNA අච්චුව නිස්සාරණය කිරීමට සහ පිරිසිදු කිරීමට Foregene Total RNA Isolation Kit series kit භාවිතා කිරීම නිර්දේශ කෙරේ) හෝ නියැදි ඉරිතැලීම් නිෂ්පාදන ( Foregene Lysis පද්ධතිය භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ), විශේෂිත ප්‍රයිමර් (10 μM) සහ අනෙකුත් අදාළ පරිභෝජන ද්‍රව්‍ය, උපකරණ.
2. 2× සෘජු RT-qPCR බෆරය, RNase-Free ddH2O සහ 20× ROX Reference Dye (එය නම්'අවශ්‍ය වේ) අයිස් සහිත පෙට්ටියේ, මේවා ස්වභාවිකව දිය වී මෘදු ලෙස මිශ්‍ර කර ඇත.
B: සූදානම් කරන්න of RT-qPCR පද්ධති
වගුව 1 : සූදානම් කරන්න of RT-qPCR sපද්ධතිය
| සංරචකය | පරිමාව | අවසාන සාන්ද්රණය |
| 2× සෘජු RT-qPCR බෆරය | 10 μL | 1× |
| සෘජු එන්සයිම මිශ්රණය | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ප්‍රතිලෝම ප්‍රයිමර් (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| පරීක්ෂණය (4 μM) | 1μL | 200nM |
| සැකිල්ල (RNA හෝ Lysate) | X μL | |
| 20×ROX යොමු ඩයි | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| මුළු පරිමාව | 20μL |
C: සකසන්න එම RT-qPCR ප්රතික්රියාව වැඩසටහන
වගුව 2 : RT-qPCR ප්රතික්රියාon වැඩසටහන සැකසීම (සදහා උදාහරණයක්: දෙක-පියවර ක්රමය)
| පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් | අන්තර්ගතය | |
| 1 | 50℃ | විනාඩි 15 | 1* | 1 | ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම |
| 2 | 95℃ | විනාඩි 1 | 1 | පූර්ව නිරෝධනය | |
| 3 | 95℃ | තත්පර 10 | 40-45 | Denaturation | |
| 60℃ | තත්පර 30 2* | Anneal/Extension | |||
ගබඩා කිරීම සහ කල් තබා ගැනීම
කට්ටලය -20 හි ගබඩා කළ යුතුය± 5℃.වලංගු කාලය මාස 12 කි.
නැවත නැවත කැටි-දියවන චක්‍රවලින් වළකින්න (චක්‍ර <5).
